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大肠杆菌抗氟乙酸变株的选育及其对GL-7-ACA酰化酶基因表达的影响

摘要

在以大肠杆菌为宿主生产外源重组蛋白的过程中,乙酸的分泌与积累是阻遏细胞生长及重组蛋白表达的重要因素,降低宿主菌的乙酸积累对提高重组蛋白的产量至关重要。本研究通过筛选,获得可在含氟乙酸培养基中生长的大肠杆菌(E.coli)抗性突变株DP19、DP8,主化鉴定证明DP19为磷酸转乙醉酶(phosphotransacetylase,简称PTA)基因缺陷(pla)型,DP8为乙酸激酶(acetale kinase,简称ACK)基因缺陷(ack)型。pta型具有乙酸分泌量大大低于亲株的特点。以之作宿主表达连接于质粒 pMR24上的GL-7ACA酰化酶基因,可使表达量明显提高。

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