产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

罗晖; 胡晓佳; 周航; 童忆舟; 于慧敏; 李强; 沈忠耀

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产GL-7-ACA酰化酶重组大肠杆菌的构建和表达

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为了实现GL-7-ACA酰化酶在大肠杆菌中的成功表达,将GL-7-ACA酰化酶基因用PCR的方法去除其信号肽序列,并将其连接到质粒pET-28a,通过筛选得到了表达GL-7-ACA酰化酶的重组菌BL21(DE3)/pET-ACY.分别考察了诱导温度、菌浓(OD600)、诱导剂IPTG的用量等因素对重组菌表达GL-7-ACA酰化酶的影响.在优化条件下,GL-7-ACA酰化酶酶活可达266 U/L.GL-7-ACA酰化酶经一步DEAE-Sepharose纯化即可达到80%的纯度,酶活收率为50%.

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来源
《微生物学通报》 |2004年第4期|38-42|共5页
作者
罗晖; 胡晓佳; 周航; 童忆舟; 于慧敏; 李强; 沈忠耀;
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作者单位

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

清华大学化工系生物化学研究所,北京,100084;

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正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
GL-7-ACA 酰化酶,大肠杆菌,表达;

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