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绿竹BoGPIAP基因克隆与异位表达研究

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糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白(GPIAP)因其结构和功能的多样性,决定了其在各种生物学过程中都发挥着重要作用.采用同源克隆的方法从绿竹(Bambusa oldhamii)中获得一个GPIAP同源基因,命名为BoGPIAP,cDNA全长1772 bp,其中包括1356 bp的开放阅读框,编码一个451 aa的的蛋白.蛋白结构分析表明,该蛋白包含1个典型的GPIAP家族保守区域(47-211)络合素合酶相像蛋白和1个CCVS结构域,在N-端和C-端分别具有1个跨膜信号肽和1个GPI锚定信号肽,属于GPIAP家族.构建BoGPIAP与GFP融合的表达载体,在洋葱表皮细胞中瞬时表达,结果显示BoCOBL::GFP融合蛋白定位于细胞膜上,证明BoGPIAP基因编码的蛋白为膜蛋白.分别构建BoGPIAP的正义、反义表达载体并转化烟草(Nicotiana tabacum).PCR检测结果表明,BoGPIAP已转入烟草.与野生型相比,转反义基因植株细弱,纤维细胞壁明显变薄;而转正义基因植株粗壮,纤维细胞壁明显变厚.表明BoGPIAP可能对竹子纤维细胞壁的发育具有调控作用.

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来源
《第十一届中国林业青年学术年会第8分会场》|2014年|44-50|共7页
会议地点陕西杨凌
作者
DONG Lili; 董丽莉; SUN Huayu; 孙化雨; ZHAO Hansheng; 赵韩生; LOU Yongfeng; 娄永峰; WANG Lili; 王丽丽; GAO Zhimin; 高志民;
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作者单位

中国林学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 Q949.714.2;
关键词
绿竹; 糖基化磷脂酰肌醇锚定蛋白基因; 同源克隆技术; 异位表达技术;

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