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茄科青枯病拮抗菌的筛选及鉴定

摘要

茄科青枯病是一种毁灭性土传病害,主要危害番茄、烟草、辣椒、茄子等作物,至今还没有一种安全有效的药剂能够防治它,因此发掘有效的生防菌进行生物防治,其现实意义十分重大。本研究分离筛选出对番茄青枯病菌有拮抗作用的内生细菌001、009和011,对它们进行分类鉴定,测定它们的生物学特性和抑菌谱;着重对内生细菌001菌株的内生定殖、促生作用及产生的抗菌物质的纯化与其发酵条件等进行了研究,同时开展了对烟草青枯病的田间防治试验,为利用内生细菌防治烟草青枯病奠定了理论和应用基础。从湖南永州、郴州、衡阳和宁乡等的病区健康烟草茎秆中分离到160个内生菌株,其中32个在室内对19株不同青枯菌菌株具有拮抗效果,占到总菌株数的20.0%。在这32个菌株中以001、009、011抑制圈半径较大,分别为3.Omm、3.Omm、4.5mm,故将内生菌株001、009、011作为重点研究对象。抑制病力强的烟草青枯病菌2316菌株,作为测定拮抗菌拮抗性的标准病原菌株。结合001、009、011内生菌株形态学特征、生理生化性状、16SrDNA序列分析和根据MEGA3软件得到系统发育树等,确定001菌株属枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。菌株009和011属短短芽孢杆菌Brevibacillus brevis。菌株001、009、011的16S rDNA序列在GenBank数据库中的登录号分别为DQ444283、DQ444284、DQ444285。采用内生拮抗菌009和土壤菌株011混合防治烟草青枯病、番茄青枯病,其田间防治效果分别为82.5%和85.4%,其田间应用的剂型还有待进一步研究。

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