EPS对LPS损伤RAW264.7细胞NF-κB和MAPK信号通路的影响

摘要

为了研究EPS(紫锥菊多糖)对LPS损伤RAW264.7细胞NF-κB和MAPK蛋白表达的影响.试验分为空白照组、LPS组和100μg/mL EPS+LPS组,分别提取胞浆蛋白和胞核蛋白,经SDS-PAGE凝胶电泳后,经考马斯亮蓝染色和Western-Blot检测NF-κB p65、NF-κB p-p65、IκB-α、p-IκB-α、JNK/p-JNK、ERK/p-ERK、p38/p-p38几种蛋白的表达.结果显示,当LPS刺激RAW264.7时,细胞核内NF-κB p65、NF-κB p-p65、p-IκB-α蛋白表达增加,与LPS组相比,而EPS组在3h、6h时能够有效抑制NF-κB p65蛋白表达的增加,在1h、3h、6h时抑制NF-κB p-p65表达的增加;EPS组在1h、3h时能够有效抑制IκB-α蛋白表达的减少(p<0.05),在6h时能够有效抑制p-IκB-α蛋白表达的增加(p<0.05),说明EPS抑制炎症反应与抑制核因子NF-κB蛋白的表达有关.当LPS刺激RAW264.7时,在1h、3h、6h时JNK、ERK、p38蛋白表达量随着作用时间的延长而明显降低,p-JNK、p-ERK、p-p38蛋白表达量明显升高,与LPS组相比,EPS组的JNK、ERK、p38蛋白表达量均高于LPS组,而p-JNK、p-ERK、p-p38表达量显著降低.其中在3h和6h时各组蛋白变化比较明显,说明EPS抑制炎症反应与激活MAPK信号通路有关.

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