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利用FPLC分析转基因小型猪血浆脂蛋白

摘要

载脂蛋白CⅢ(Apolipoprotein CⅢ,ApoCⅢ)是一种低分子水溶性蛋白质,79个氨基酸残基,单链多肽,分子量为8.7~8.8kD,主要分布在血浆高密度脂蛋白(HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(CM)中.ApoCⅢ抑制脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)[1-4],但没有证据显示它们之间存在直接结合[5].应用核移植[6]等技术,获得了人ApoCⅢ(hApoCⅢ)转基因克隆小型猪[7].hApoCⅢ转基因克隆猪由于过表达了人的ApoCⅢ蛋白,其脂蛋白构成发生了变化,由此也带来了一些生理功能方面的改变,本文对此进行了分析和探讨.FPLC全称为快速蛋白液相色谱其原理与高效液相色谱理论类似,利用不同的色谱柱(疏水、离子交换、凝胶、亲和、反相等),将所需的蛋白质、多肽及多核苷酸或要去除的杂蛋白从样品中分离出来。FPLC不但保持了HPLC的快速、高分辨率等特性,而且还具有柱容量大、回收效率高及不易使生物大分子失活等特性;因此在近年来在分离蛋白质、多肽及寡核苷酸等方面得到了广泛应用。

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