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高成脂分化能力脂肪干细胞的筛选与体外诱导

摘要

目的:观察兔脂肪干细胞(rASCs)表面标志物CD54与其成脂分化能力的关系,同时探讨同一诱导剂对两种rASCs成脂分化的影响,为构建工程化脂肪组织寻找理想的种子细胞及诱导方法. 方法:取新西兰大白兔(1.5~2.0kg,8~12周龄)腹股沟皮下脂肪垫3ml,采用贴壁法体外分离培养rASCs并行多向分化诱导及细胞表现标志物鉴定.取P3代细胞经免疫磁珠分选后,将rASCs分为两类,一类为CD54+rASCs,另一类为CD54rASCs;将通用的同一种成脂分化诱导剂处理这两类细胞,实验分为A、B两组进行,A组为CD54+rASCs+诱导剂,B组为CD54rASCs+常规诱导剂.细胞成脂诱导14d,分别行油红O染色,检测成熟脂肪细胞的密度及细胞内脂滴含量;比较分析两组rASCs成脂分化的能力. 结果:rASCs具有间充质干细胞特性,可向成熟脂肪细胞、成骨细胞和软骨细胞表型分化,细胞表面标志物CD29、CD44、CD49d、CD54、CD73、CD90和CD105表达均为阳性,而CD31、CD34和CD45表达阴性;成脂诱导第14d,A、B两组rASCs分化为成熟脂肪细胞的密度分别为21.7±3.3和9.2±1.1,细胞内脂滴含量分别为1.69±0.22和0.53±0.07;经统计分析,A、B两组比较,P值均小于0.05,差异均有显著性意义. 结论:CD54阳性的脂肪干细胞具有高成脂分化能力,为构建大体积组织工程化脂肪提供理论基础.

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