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天然花粉多孔材料的功能化及其在蛋白质酶解和富集中的应用

摘要

本论文针对蛋白质酶解以及特异性蛋白分离富集等方面的热点问题,以花粉骨架材料为基础,开展研究工作,发展了一些关于蛋白质快速酶解和低丰度蛋白选择性富集的新方法。首先是研究发展了花粉骨架多溶剂超声提取方法处理蜂花粉,得到了后续实验所需的花粉骨架结构。之后研究探讨了一种基于花粉材料的简单、快速的蛋白酶解方法。以天然多孔材料花粉为载体,将胰蛋白酶成功固定在材料表面并将其用以酶解。测定了胰蛋白酶的负载量,采用MALDI-TOF-MS技术对肌红蛋白酶解液进行质谱分析,对数据进行了Mascot肽段质量指纹图谱搜库匹配,获得了预期效果。之后研究了的天然多孔材料花粉固定Ti4+对磷酸化肽段的高效选择性富集技术。结合MALDI-TOF-MS鉴定技术,考察了酪蛋白溶液中的磷酸化肽段的富集效果,验证了方法的可行性。总之,本论文围绕蛋白质组学研究,利用天然多孔材料,为解决蛋白质分析中快速酶解和低丰度肽段的分离富集提供了新的材料和方法。

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