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长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒抗体ELISA检测方法的建立与应用

摘要

目的:建立长爪沙鼠淋巴细胞脉络丛炎病毒(LCMV)抗体ELISA检测方法,应用于长爪沙鼠携带LCMV的检测. 方法:培养Vero细胞,接种LCMV毒种,制备Vero正常抗原和LCMV特异抗原,滴定酶结合物、正常抗原及特异抗原最佳工作浓度,并进行方法的特异性、敏感性、精密性、稳定性实验. 结果:正常抗原、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为0.4μg/ml、10μg/ml和1∶5000;正常抗原、特异抗原批内变异系数分别为6.8%和8.9%,批间平均变异系数分别为9.3%和8.4%;检测灵敏度达到1∶1280;与小鼠仙台病毒(SV)、小鼠呼肠孤病毒3型(Reo3)均无交叉反应.稳定性试验相对偏差小于25%. 结论:建立的ELISA方法特异性、敏感性强,重复性、稳定性好.可用于长爪沙鼠LCMV抗体的检测.

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