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Ⅲ型前胶原氨基端肽的化学发光定量检测

摘要

目的:建立人血清中Ⅲ型前胶原氨基端肤(PⅢNP)的定量微孔板化学发光酶免疫检测方法.方法:辣根过氧化物酶标记PⅢNP单抗,选用鲁米诺化学发光体系检测,优化各类反应液的工作浓度和各种反应条件,建立双抗体夹心的检测方法;同时评价所建立方法的灵敏度、特异性、线性范围、稳定性等性能指标;并应用临床血清与进口试剂进行比对实验.结果:所建立方法的线性范围为0.8~85ng/mL,灵敏度0.5ng/mL,批内、批间变异均小于10%.检测PⅢNP的临床高、中、低值血清回收率分别为96.2%、91.2%和101.1%;在4℃和37℃条件下分别进行了3d、5d、7d的稳定性考察,线性相关系数均>0.99,标准偏差<6%;比对实验分析显示与进口试剂相关性具有统计学意义.结论:成功建立了定量PⅢNP化学发光酶免疫分析方法,并且有较好的准确性、灵敏度、重复性,与进口试剂检测结果等效.

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