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单纯疱疹病毒Ⅱ型gC蛋白在哺乳动物细胞中的表达及免疫原性检测

摘要

目的:在哺乳动物细胞中表达并纯化单纯疱疹病毒Ⅱ型表面糖蛋白C(glycoprotein C,gC)胞外抗原表位富集区片段,对其免疫活性进行分析.方法:优化筛选HSV-2 gC蛋白胞外抗原富集区基因序列并化学合成,以pMCE5为载体构建,构建真核表达质粒pMCE5-gC2并转染至CHO细胞进行真核表达,亲和层析纯化重组蛋白.以纯化的gC2重组蛋白为抗原,混合弗氏佐剂免疫小鼠,制备抗血清,间接ELISA法检测其效价.结果:成功构建真核表达重组质粒pMCE5-gC2,并纯化获得浓度为401tg/ml的gC2重组蛋白.通过三次免疫小鼠,获得抗体效价达到3×108的高滴度的抗血清.讨沦:在哺乳动物细胞中表达纯化获得的gC2重组蛋白具有良好的免疫原性,为HSV亚单位疫苗及检测试剂的研制打下了良好的基础.

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