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O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及其抗原识别位点的初步分析

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制备针对O型口蹄疫病毒VP1蛋白的单克隆抗体,并对其抗原识别位点进行初步分析.应用大肠杆菌表达的O型口蹄疫病毒VP1蛋白免疫BALB/C小鼠.取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用间接ELISA筛选阳性克隆.获得了ⅠC8、ⅡF9和ⅢF9三株稳定分泌McAb的杂交瘤细胞株.通过间接ELISA测定,单抗效价范围是:细胞培养上清1:320-1:640,腹水为1:4×105-1:2×106;经ELISA法测定,三种单克隆抗体均与表达抗原反应;在western-blotting试验中,三种单克隆抗体均与大肠杆菌表达的VP1蛋白反应.单抗的亚类鉴定结果表明,ⅠC8分泌的抗体为lgG2b亚类,ⅡF9和ⅢF9分泌的抗体为IgGl亚类.抗原识别位点分析表明,三种单抗识别的抗原位点不尽相同,其中ⅠC8与另外两种单抗识别的抗原位点不同,而ⅡF9和ⅢF9的识别位点相近,且ⅢF9的识别位点在ⅡF9的识别位点之内。

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来源
《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届全国会员代表大会暨第11次学术研讨会》|2005年|944-947|共4页
会议地点四川雅安
作者
鲁会军; 韩松; 郑敏; 王凯; 贾雷立; 葛淑敏; 金扩世; 金宁一;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类病毒病;
关键词
FMDV; O型口蹄疫病毒; VP1蛋白; 单克隆抗体; 抗原识别位点;

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