兔出血症病毒的分离鉴定及RT-PCR检测方法的建立

摘要

本研究从临床病料中分离鉴定出1株兔出血症病毒(RHDV),并根据已报道的兔出血症病毒衣壳蛋白(VP60)基因序列,进行同源性比较,设计了一对各为21bp的引物,建立了检测RHDV的RT-PCR方法.采用该方法检测RHDV能扩增出特异性的约500bp的片段,序列分析表明该核苷酸序列与国内外报道的多株RHDV序列相互间同源性高达91.3﹪-96.8﹪.建立的RT-PCR方法能够从人工感染RHDV致死兔的心、肝、肺、肾、血液等组织检测出病毒RNA.该方法快速、灵敏,检测病毒核酸灵敏度可达2.15ug.mL-1,为兔出血症的早期确诊和分子流行病学调查奠定了基础.

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