鸡IL-18基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及分泌表达

摘要

白介素-18(IL-18)是近年发现的一种重要的细胞因子,具诱生IFN-γ、促进T细胞增殖分化、增强GM-CSF和IL-2的产生及NK细胞、CTL细胞的活性等生物学功能。因此,IL-18在增强免疫、抗微生物感染、抗肿瘤等方面有着广阔的应用前景。近年来,IL-18的研究主要集中于人和鼠方面,而对鸡IL-18的研究则起步较晚,直到Schneider K首次获得ChIL-18 cDNA,此后潘蔚绮等、刘胜旺等和温纳相等分别得到了不同品种鸡的ChIL-18成熟蛋白基因。但目前ChIL-18的克隆表述研究仅在原核表达系统中有一定的进展,在毕赤酵母表达系统中的表达目前国内外尚未见有关报道。本研究通过对MChIL-18成熟蛋白基因进行定点突变,把毕赤酵母的低频密码子突变为同义偏嗜性密码子,并构建分泌型重组表达载体pPICZαA-MChIl18,使MChIL-18整合到酵母染色体中,实现了鸡MChIL-18成熟蛋白基因在毕赤酵母中的高效表达,为进一步研究ChIL-18的生物学特性奠定良好的基础。

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