基于串联质谱的大豆分离蛋白组份分析

摘要

以大豆低温脱脂豆粕为原料,利用传统的碱提酸沉工艺提取大豆分离蛋白,利用液相色谱-串联质谱技术(HPLC-MS/MS)研究大豆分离蛋白组成。实验首先使用高效液相色谱法将大豆分离蛋白提取物中的不同蛋白组份进行了分离并将分离出的各组份收集,使用热处理法将大豆分离蛋白组份进行失活处理,利用胰蛋白酶抑制剂将分离出的各蛋白组份进行了酶解处理,使用HPLC-MS/MS对酶解产物中的多肽组成进行了分析。结果表明大豆分离蛋白经高效液相色谱分离后各色谱峰的酶解产物中主要有2S组份中的清蛋白、蛋白酶抑制剂等;7S组分中的、和亚基等;11S组分中的A5A483、A281a、A1aBx、A384。实验进一步对大豆分离蛋白的色谱分离条件和各组份酶解产物的色谱分离及质谱分析条件进行了优化,确定了大豆分离蛋白色谱分离后各组份的蛋白归属性。结果表明大豆分离蛋白提取物中的蛋白质组分与目标峰识别结果一致,利用HPLC-MS/MS技术可有效识别大豆分离蛋白提取物中的各个蛋白质组份,并通过色谱峰面积反映样品中各个蛋白组份相对含量信息,本研究为进一步探索大豆分离蛋白提取过程中不同种类蛋白质的释放行为提供了技术参考。

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