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高糖乏氧环境下大鼠海马神经元HIF-1α、Nox4、p47phox因子的表达及脑神康胶囊的干预作用

摘要

目的:研究高糖乏氧环境下体外培养的大鼠海马神经元HIF-1α、Nox4、p47phox因子的表达及探讨脑神康胶囊对损伤神经元的保护作用机制.方法:原代培养大鼠海马神经元,将细胞随机分为6组:正常对照组,高糖乏氧组,黄芪组,脑神康低(5ml/kg)、中(10ml/kg)、高剂量(20ml/kg)组.正常对照组用低糖型DMEM培养基培养,其余5组用葡萄糖浓度为25memol/L的DMEM培养基培养, 8天后除正常对照组外,其余各组均用黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶处理建立氧化损伤模型,其中黄芪组及中药各剂量组分别在加入黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶之前换以黄芪和不同浓度中药含药血清的DMEM培养液,干预12h后用MTT法测细胞存活率,流式细胞术测细胞凋亡率, Real-time PCR法检测各组海马神经元HIF-1αmRNA、Nox4mRNA、p47phox mRNA的表达.结果:与正常对照组比较,高糖乏氧组神经元存活率显著下降,神经元凋亡率,HIF-1αmRNA、Nox4 mRNA和p47phox mRNA的表达显著上升(P均<0.01);与高糖乏氧组比较,黄芪组及脑神康各浓度组神经元存活率明显上升,神经元凋亡率,HIF-1α mRNA、Nox4 mRNA和p47phox mRNA的表达均下降,其中高浓度组最低,具有明显的统计学意义(P均<0.05).结论:脑神康胶囊对高糖乏氧环境下大鼠海马神经元有明显的保护作用,其作用机制可能为下调HIF-1αmRNA、Nox4 mRNA和p47phox mRNA的表达,减轻氧化应激损伤相关.

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