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外源性硫化氢对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复损伤的作用

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目的：研究外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对大鼠海马神经元氧糖缺失/恢复(oxygen-glucose deprivation and recovery,OGD/R)损伤的作用,并探讨其可能的机制.方法：孕16-18d胎鼠海马神经元原代培养,培养7d后NSE免疫组化法作神经元鉴定,培养第8天时OGD1h/R24h造成缺氧/复氧损伤,缺氧同时给予硫氢化钠(sodium hydrosulphide,NaHS)干预.将大鼠海马神经元随机分为3组:正常培养组(Ⅰ组)、OGD/R组(Ⅱ组)、OGD/R+NaHS组(Ⅲ组),Ⅲ组又根据NaHS浓度分Ⅲ1-5亚组,NaHS浓度分别为25、50、100、200、4001μmol/L.MTT法测定各组细胞活力,比色法检测各组培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,流式法检测各组细胞凋亡,RT-PCR法检测各组细胞Caspase-3 mRNA,HIF-1αmRNA表达.结果：与正常组相比较，模型组细胞活力明显降低，培养液中LDH漏出增多，凋亡加重，Caspase-3 mRNA,HIF-1αmRNA表达增高(P<0.01);与模型组相比较，Ⅲ1组细胞活力、培养液中LDH漏出、凋亡、Caspase-3mRNA, HIF-1αmRNA表达的差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比较，Ⅲ2-4组细胞活力明显增高，培养液中LDH漏出减轻，凋亡减轻，Caspase-3 mRNA表达明显降低，HIF-1αmRNA表达明显增高(P<0.01）;与模型组相比较，ⅢS组细胞活力明显降低，培养液中LDH漏出增多，凋亡加重，Caspase-3 mRNA表达明显增高，HIF-1αmRNA表达明显降低(P<0.01)。结论：低浓度H2S(25Nmol/L)对海马神经元OGD/R损伤无明显影响，中浓度H2S(50-200Nmol/L)可以减轻海马神经元OGD/R损伤，增加细胞活力，减轻细胞凋亡，但高浓度H2S（400Nmol/L)则可加重其损伤:海马神经元OGD/R损伤后HIF-1αmRNA表达增强，适当浓度H2S(50-200Nmol/L)可能通过上调HIF-lα的表达发挥保护作用。

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来源
《中华医学会急诊医学分会第十六次全国急诊医学学术年会》|2013年|185-186|共2页
会议地点成都
作者
刘蓓蓓; 潘昊; 陈娣; 谢学猛; 杨光田;
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作者单位

中华医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类周围神经及神经节疾病;
关键词
神经元氧糖缺失; 神经元氧糖恢复; 外源性硫化氢; 损伤机制;

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