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气体信号分子硫化氢对高脂血症的影响及其机制

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摘要

目的：研究内源性硫化氢对高脂血症的调节作用.方法：第一部分:①雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、AS组、AS+NaHs组.AS组和AS+NaHS组大鼠腹腔注射VD3(700000U/kg/只)连续3天,并给予高脂饮食8周.AS+NaHS组大鼠每天腹腔注射H2S供体NaHS,对照组和AS组每天腹腔注射同等剂量的生理盐水.采用生化法测血清中血脂含量,用敏感硫电极法测定血浆H2S的含量,western blotting测肝脏组织内源性硫化氢生成酶胱硫醚-β-合成酶(CBS)、胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)和巯基丙酮酸转硫酶(MPST)的含量;western blotting测大鼠肝脏组织中LDLR基因和蛋白表达;②细胞部分采用人源低密度脂蛋白(LDL)负荷制备细胞模型,应用人肝癌细胞株(HepG2细胞),分为3组:control组,细胞于基础培养基中培养48h;LDL组,细胞于基础培养基中培养,加入50μg/ml LDL孵育48h;LDL+NaHS组,培养液中分别先加入1、10、100和500μmol/L NaHS孵育0.5h后,在NaHS的继续存在下加入50μg/ml LDL,继续孵育48h.第二部分:雄性C57BL/6和LDLR基因敲除(LDLR-/-)小鼠随机分为3组:对照组(C57BL/6)、LDLR-/-组、LDLR-/-+NaHS组.LDLR-/-+NaHS组小鼠每天腹腔注射H2S供体NaHS,对照组(C57BL/6)和LDLR-/-组每天注射同等剂量的生理盐水.LDLR-/-组和LDLR-/-+NaHS组给予高脂饲料连续喂养16周,采用生化法测血清脂质.结果：第一部分:与正常对照组大鼠相比,AS组大鼠血浆总胆固醇(TCHO),LDL明显降低(P均＜0.01);与AS组相比,AS+NaHS组大鼠血浆TCHO、LDL明显降低(p均＜0.01);肝组织中CSE、CBS、MPST均下调;与LDL组相比,LDL+NaHS组(NaHS浓度分别为1、10、100和500μmol/L)LDLR蛋白表达显著升高(P均＜0.01);第二部分:与正常对照组小鼠相比,LDLR-/-小鼠中TCHO和LDL-C明显升高(p值均＞0.05);给予NaHS后,LDLR-/-小鼠血清中TCHO、LDL-C、HDL-C水平无明显变化.结论：高脂血症大鼠肝脏组织内源性H2S生成显著降低;高脂血症大鼠肝脏组织内源性H2S体系下调;给高脂血症的大鼠补充H2S供体NaHS后可显著增加血浆及肝脏中内源性H2S含量及产率;H2S促进LDL干预的HepG2细胞LDLR蛋白表达.给高脂饮食的LDLR-/-小鼠补充H2S供体NaHS后血脂紊乱没有改善.H2S通过上调肝脏组织LDLR的表达降低LDL水平来发挥对高脂血症的调节作用.

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