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ChM-I基因转染抑制BMSCs构建软骨血管化的实验研究

摘要

目的:应用BMSCs构建的软骨组织经体内长期移植后逐渐出现血管侵入、矿化、形成骨组织.本研究观察了血管生成抑制因子ChM-I BMSCs体内构建软骨血管化的作用,为改善和提高BMSCs来源的软骨组织的表型稳定性提供新的方法.rn 方法:用RT-PCR的方法比较ChM-I基因在BMSCs和关节软骨细胞之间的表达差异.用RT-PCR的方法从兔的关节软骨组织中获得ChM-I基因克隆并构建高滴度的重组腺病毒Ad5-ChM-I.将转染重组腺病毒Ad5-ChM-I的BMSCs与珊瑚材料复合物移植到裸鼠皮下1~2个月后,通过大体标本、组织学观察研究体内构建的软骨组织的血管化的程度,分析软骨表型的变化.rn 结果:实验结果表明ChM-I在BMSCs中几乎不表达,而在软骨细胞中高表达,此外,两种细胞之间Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达也存在显著的差异;转染Ad5-ChM-I的BMSCs在体内形成的软骨组织的血管化程度很低,而BMSCs在体内形成的软骨组织逐渐出现血管化、骨化;免疫荧光结果显示,ChM-I在转染后的BMSCs形成的软骨组织中有一定的表达分布,而在未转染细胞形成的组织中无表达。rn 结论: ChM-I基因转染可以抑制BMSCs构建组织工程软骨的血管化,有益于维持软骨组织表型的稳定。

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