参灵草对细胞复制性衰老的干预作用及机制研究

摘要

目的:通过观察参灵草复方对细胞寿命、生长活力、衰老相关β半乳糖苷酶活性及细胞周期的影响,确定参灵草对细胞复制性衰老的干预作用,并探讨其可能的作用机制. 方法:用人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)连续培养至42代时,建立复制性衰老细胞模型并分组,细胞计数绘制各组衰老细胞生长曲线;免疫组化法检测β-半乳糖苷酶染色阳性率;流式细胞仪检测细胞周期.RT-PCR法检测p16和p21基因mRNA的表达;ELISA试剂盒检测细胞总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的含量;TRAP-PCR银染法检测细胞端粒酶活性;试剂盒测定细胞内SOD、MDA的含量. 结果:参灵草能够提高细胞的生长增殖活力,降低β-半乳糖苷酶染色阳性率,降低G1期细胞的比例同时提高增殖指数PI,降低p16mRNA和p21mRNA的表达,升高磷酸化状态的Rb蛋白含量,升高端粒酶活性,升高SOD活力并降低自由基水平. 结论:参灵草能够对抗细胞复制性衰老,并且其抗衰老机制可能是通过抑制p16和p21mRNA的表达,促进磷酸化Rb蛋白的产生,保护端粒酶活性剂抗氧化作用有关.

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