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合成基因回路在大鼠体内的降尿酸功能验证

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目的:利用合成生物学的方法构建感应并调控尿酸的基因回路,在细胞和动物水平上验证该基因回路对尿酸的调控作用,为进一步研究干细胞治疗高尿酸疾病奠定基础. 方法:将优化的耐辐射型球菌R1转录抑制物基因mUTs及其结合位点的8串联结构基因hucO8以及优化的黄曲霉菌尿酸酶基因smUox,用内部核糖体结合位点IRES串联成基因回路mUTs-hucO8-smUox(MHS),进行人工合成,构建哺乳动物表达载体pIRES2-EGFP-MHS.瞬时转染293T细胞，利用实时定量PCR、Western Blot、以及尿酸含量检测，分别从细胞和动物水平来验证该基因回路对尿酸的调控功能。结果：实时定量PCR 及 Western Blot结果显示该回路的基因能够正常转录并表达；细胞上清及高尿酸大鼠血清尿酸的检测结果表明，该基因回路能够降低环境中的尿酸浓度。结论：设计的mUTs-hucO8-smUox基因回路，能够在细胞及动物水平上实现降尿酸的功能。

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来源
《中国生物工程学会第十二届学术年会暨2018年全国生物技术大会》|2018年|1-8|共8页
会议地点长沙
作者
ZHANG Xia; 张霞; 王诗语; WANG Shi-yu; WANG He-rong; 王鹤蓉; HUANG Zi-hao;
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作者单位

中国生物工程学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 R589.705.7;
关键词
高尿酸疾病; 干细胞治疗; 基因回路; 降尿酸作用;

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