• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文会议>第一届布鲁氏菌病国际学术交流会 >布鲁氏菌病Tb噬菌体生物学参数的研究

布鲁氏菌病Tb噬菌体生物学参数的研究

页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

目的：确定布鲁氏菌病Tb噬菌体增殖培养、传代、保存及灭活的生物学参数,为科学繁殖和正确使用布鲁氏菌病Tb噬菌体提供参考. 方法：预先将200ul布鲁氏菌A19(1010CFU/ml)接种100ml TSB培养基,按37°C、200rpm振荡培养不同时间(0h、2h、4h、6h和8h),分别加入200ul Tb(105RTD),在振荡培养不同时间点(12h、24h、48h和72h)分别收获噬菌体,进行RTD(临界试验稀释裂解法)含量测定考察其合适的增菌时间和收获点;进一步分别以200ul不同A19菌液浓度(104、106、108、1010)CFU/ml和200ul不同Tb含量(103、105、107)RTD为各自参数变量收获噬菌体进行含量测定,考察繁殖所需适宜的菌液浓度及Tb浓度.将Tb以A19为宿主菌同条件连传5代,取第1、3、5代进行含量测定,确定其传代性能;将Tb冻干,一并与液体Tb在-15°C、2～8°C和37°C分别保存2个月,期间取2周、4周、6周及3个月进行RTD测定,确定其合适保存方式.将Tb分别用等量的不同牛种布鲁氏菌参考菌株(A19、104M、2308、RA343)同条件培养收获噬菌体,测定其含量,以评估其不同菌株的裂解能力;接着运用紫外线照射不同时间(15min、1h、2h),80°C水浴不同时间(5min、30min、1h、3h)以及消毒剂(70％乙醇、1％新洁尔灭、过硫酸氢钾)作用5min评估不同理化因子的消毒效果. 结果：预先将A19振荡培养增菌6h接Tb毒,在37°C、200rpm振荡培养24～48h收获的Tb噬菌体含量最高(达107RTD).不同菌液浓度培养繁殖噬菌体结果表明,菌数与Tb繁殖量呈正相关关系,菌液浓度为1010CFU/ml收获的噬菌体含量最高,达到107RTD;不同浓度Tb增殖培养噬菌体效果表明,Tb接种的浓度为107RTD时,其收获的Tb噬菌体含量最高(达107RTD).传代检测结果显示,连传5代,Tb病毒含量逐步升高并保持稳定,其第1,3,5代含量分别为:106RTD、107RTD、107RTD.冻干Tb及液体Tb在-15°C、2～8°C均可保存3月,而37°C时,冻干Tb可稳定保存1个月,液体Tb可稳定保存2周.Tb对不同菌株裂解试验结果表明,其具有广谱的裂解光滑型牛种布鲁氏菌能力,对粗糙型布鲁氏菌裂解作用较小,最适宜的增殖宿主菌为A19和104M.不同理化因子灭活试验结果显示紫外线照射有灭活效果,照射15min、1h、2h和6h,病毒含量分别下降1-2个滴度(RTD为104-105)、2-3个滴度(RTD为103-104)、4-5个滴度(RTD为102-103)和完全灭活.而80°C水浴加热5min可下降3个滴度,30min即可完全灭活;70％乙醇、1％新洁尔灭作用10分钟则无法完全灭活,而0.5％过硫酸氢钾消毒液完全灭活. 结论：运用A19疫苗株液体培养繁殖Tb,可获得较高的、稳定病毒含量的噬菌体,该噬菌体可以以冻干方式和液体方式实现较长期保存,并具有广谱的裂解布鲁氏菌能力,能够被常见的理化因子有效灭活.

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
获取原文

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号