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反相高效液相色谱法测定人血浆中6-巯基嘌呤的浓度

摘要

目的:建立血浆中硫唑嘌呤活性代谢产物6-巯基嘌呤浓度测定的高效液相色谱分析方法.方法:以200μL6-巯基嘌呤血浆样品为内标,加5OOμL乙睛沉淀蛋白,10000r/min离心1Omin吸取上清液55℃下氮气吹干,以流动相100μL复溶,10000r/min离心1Omin,取上清液20μL进样.结果:在2.5~200ng/mL浓度范围内,线性关系良好(r=0.9996);血浆最低检测限为2.5ng/mL;高(125ng/mL)、中(25ng/mL)、低(5ng/mL)三个浓度的日内RSD及日间RSD在1.52%~6.28%之间;三个浓度的平均提取回收率在91.49%~102.43%之间;专属性、重复性、稳定性、冻融循环等试验均在允许范围内.6-MP出峰时间在6.2min,6-TG出峰时间在7.1min.讨论: 反相高效液相色谱法准确、快速、专一、灵敏,能适用于6-MP的药物浓度监测研究,满足临床需要.

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