双峰驼乳中重链抗体的筛选和鉴定

摘要

本研究基于骆驼血清中重链抗体的特性及其分离纯化的方法,首次对骆驼乳免疫球蛋白(IgG)及重链抗体的提取、分离纯化技术进行了研究.并且努力开发驼乳酸奶等产品,从而提高驼乳的利用价值.本研究首先从驼乳的Ig中分离出IgG,再从IgG中分别分离纯化出三个亚类,并且要达到很高的浓度.采用proteinA和proteinG亲和层析分离纯化双峰驼乳中的重链抗体及常规抗体,并用非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳的方法测定双峰驼IgGl、IgG2和IgG3的分子量.之后采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测纯化后目标物的纯度,并测定分离纯化之后IgG占驼乳中Ig的含量以及重链抗体占总IgG的量.从双峰驼乳中亲和层析纯化出两种结构的天然IgG抗体,从双峰驼乳中成功分离获得与双峰驼血清中分子量相似的多克隆重链抗体,这些重链抗体在骆驼的体液免疫中发挥着重要的作用。

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