J亚群禽白血病病毒gp85区域抗原表位的鉴定

摘要

本实验通过肽扫描技术,利用原核表达载体pGEX-6p-1将重组表达质粒中的pET-30-gp85片段分段亚克隆并在大肠杆菌中成功表达后,用ALV-J gp85特异性单抗2D5株对分段表达的蛋白进行免疫分析.结果显示特异性单抗识别抗原表位区域为蛋白N端138aa-159aa.进一步合成小肽进行表位映射,精确定位了抗原表位关键氨基酸序列为N'-LRDFIAKWKSDDLLIRPYVNQS-C',并找到导致表位抗原性改变的关键氨基酸.对进一步分析ALV-J gp85结构与功能以及建立以表位为基础的抗原抗体诊断方法或表位疫苗具有重要意义.

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