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走査型イオン伝導顕微鏡による帯電分布測定を用いた生体組織切片の観察

机译:使用扫描离子传导显微镜进行电荷分布测量,观察生物组织切片

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摘要

生体細胞や組織に存在する微小な器官を識別して高分解能観察する手法の開発は医学や薬学、生物学など多くの分野で要求されている。一般的に細胞等の小器官の観察には、試料切片を色素染色し、細胞やその周辺の有形物を可視化し,光学顕微鏡で目視観察する手段が用いられてきた。しかしながら、染色に関するノウハウや手間が必須であること、さらに光学顕微鏡には回折限界による分解能の制限があり、詳細な観察が困難であるといった問題がある。よって、染色を用いず、かつ高分解能な微視的な観察手法の開発が求められている。本研究室ではこれまでに走査型イオン伝導顕微鏡(Scanning Ion Conductance Microscopy : SICM)を用いて、生体組織の高分解能観察や試料表面の帯電分布を可視化する手法を開発し,染色体や細胞表面の帯電分布の観察結果について報告してきた。この帯電分布測定では、試料の染色を必要とせず、さらに光学顕微鏡の分解能に比べ、より詳細な表面観察が可能である。本発表では染色を施していない生体組織切片を試料とし、SICMを用いた帯電分布可視化による観察結果について報告する。Fig. 1に本装置構成を示す。本構成では複数開口を持つナノピペットを探針として用い,帯電を持つ試料上での表面形状と帯電情報を取得する.Fig. 2に本装置で取得した表面形状と帯電分布の観察結果を示す。本手法を用いることで強い負帯電を有することで知られている核の部位とその周辺部位を帯電分布を用いて識別できていることがわかる。
机译:在许多地区,如医药,制药和生物学等鉴定存在于活细胞和组织中存在的分钟器官和观察高分辨率的方法的发展是必需的。一般而言,已经染色样品部分以使样品部分可视化,可视化细胞和周围环境的切向,以及用光学显微镜观察它们。然而,存在染色的专业知识和努力的问题是必要的,并且光学显微镜由于衍射限制而具有有限的分辨率,并且难以进行详细的观察。因此,需要在不染色的情况下开发高分辨率微观观察方法。在该实验室中,我们已经开发了一种方法来可视化高分辨率的活组织观察和使用扫描离子导电显微镜(扫描离子电导显微镜:SICM)的样品表面的充电分布,以及染色体和细胞表面的充电我们报告了分布的观察结果。该充电分布测量不需要样品染色,与光学显微镜的分辨率相比,可以更详细的表面观察。在该介绍中,尚未染色的生物组织切片是样品,并且报道了通过使用SICM充电可视化的观察结果。图1显示了设备配置。在该配置中,使用具有多个开口的纳米纤维作为探针,并且获取对具有充电充电的样本的表面形状和充电信息。图2示出了该装置获取的表面形状和充电分布的观察结果。应当理解,通过使用该方法使用强烈的带负电荷来识别已知的核及其外围部位的部分及其外围部位。

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