D<'t>)是普通小麦D基因组供体,存在广泛的高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)等位变异,是小麦品质改良的重要基因资源。分离克隆这些基因不仅可以为小麦的品质育种提供具有自主知识产权的基因资源、拓展遗传基础,而且有望为研究六倍体小麦的起源和进化提供有用的信息和证据。本研究从粗山羊草中分离鉴定了3个新的HMW-G'/>
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文献综述
1.前言
2.栽培小麦的起源与进化
3.小麦种子贮藏蛋白的组成和分类
4.小麦谷蛋白亚基的分离鉴定
4.1聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
4.2高效毛细管电泳(HPCE)
4.3反相高效液相色谱(RP-HPLC)
4.4生物质谱(Mass Spectrometry,MS)技术
5.小麦谷蛋白亚基的编码位点与遗传多态性
5.1 HMW-GS的编码位点与遗传多态性
5.2 LMW-GS的编码位点与遗传多态性
6.小麦谷蛋白亚基的分子结构与聚合体模型
6.1谷蛋白亚基的分子结构
6.2谷蛋白聚合体结构模型
7.小麦谷蛋白亚基的合成积累与表达调控
7.1谷蛋白亚基合成积累的一般性规律
7.2谷蛋白亚基的表达调控
8.谷蛋白亚基与小麦品质性状的关系
8.1 HMW-GS与品质的关系
8.2 LMW-GS与小麦品质的关系
9.谷蛋白亚基编码基因的分子克隆
10.谷蛋白亚基编码基因的异源表达与遗传转化
10.1谷蛋白亚基编码基因的异源表达
10.2谷蛋白亚基编码基因的遗传转化
11.本研究的目的和意义
材料与方法
1.材料
1.1植物材料
1.2试剂和载体
1.3仪器设备
2.方法
2.1新谷蛋白亚基的鉴定
2.2新谷蛋白亚基编码基因的克隆
2.3 Glu-1D谷蛋白新亚基编码基因的原核表达
2.4序列比对、功能预测和系统进化分析
2.5谷蛋白亚基翻译后修饰位点的检测
2.6谷蛋白新亚基编码基因植物高效双元表达载体的构建
2.7植物表达载体质粒DNA向根癌农杆菌LBA4404的转化
2.8根癌农杆菌介导谷蛋白新亚基基因转化烟草
结果与分析
1.粗山羊草两个新x-型HMW-GS的鉴定、编码基因克隆及Glu-D1-1等位基因的起源与分子进化分析
1.1粗山羊草Glu-D1-1新亚基的鉴定
1.2新型亚基1Dx5*t和1Dx5.1*t编码基因的分子克隆与序列分析
1.3 1Dx5*t和1Dx5.1*t亚基编码区单核苷酸多态性(SNPs)和插入/缺失(InDels)分析
1.41Dx5*t和1Dx5*t基因原核表达分析
1.5谷蛋白亚基Glu-D1-1位点等位基因起源与系统进化分析
2.粗山羊草Glu-1Dy新亚基编码基因克隆、分子进化分析及翻译后修饰研究初探
2.1 1Dy12.1*t亚基精确分子量的测定
2.2 1Dy12.1*t亚基编码基因的分子克隆与序列分析
2.3 1Dy12.1*t亚基翻译后修饰的预测
2.4 1Dy12.1*t亚基翻译后修饰的探索
2.5 1Dy12.1*亚基与Glu-1Dy位点其他亚基同源进化分析
3.新型谷蛋白亚基基因植物双元表达载体的构建与烟草转化
3.1含有上下游启动子区和终止子区的基因植物表达载体的构建
3.2只含有编码区开放阅读框的基因植物表达载体的构建
3.3谷蛋白亚基基因转化烟草
讨 论
1.生物质谱技术与谷蛋白亚基分子量的测定
2.谷蛋白亚基的翻译后修饰
3.Network分析与谷蛋白亚基等位基因间的系统进化关系
4.Glu-D1-1等位变异的进化与栽培小麦的起源
5.Glu-1等位基因通过不合理重组产生序列重复和缺失的可能分子机制
6.谷蛋白新亚基基因植物双元表达载体的构建与烟草转化
结 论
1.粗山羊草HMW谷蛋白新亚基的鉴定及其编码基因的克隆
2.新谷蛋白亚基编码基因在大肠杆菌中的异源表达
3.Glu-1D谷蛋白亚基编码基因的系统进化分析
4.谷蛋白亚基1Dy12.1*t翻译后修饰的探索
5.谷蛋白亚基编码基因植物双元表达载体的构建及烟草转化
参考文献
作者简历
致 谢