四株鸡传染性支气管炎变异株的分离鉴定及其S1基因的分子特征

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鸡传染性支气管炎病是由冠状病毒科冠状病毒属的传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitis viraas,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性传染病。本研究从疑似鸡传染性支气管炎的濒死病鸡肾脏、腺胃组织采样，按常规处理，鸡胚接种获得4株病毒，用1％的胰酶处理病毒后，能够凝集鸡的红细胞，电镜观察发现了典型的冠状病毒粒子，初步鉴定为鸡的传染性支气管炎病毒并分别命名为TX1、TX2、PG3、DB4。随后取第四代鸡胚液进行鸡胚半数感染量(EID50)测定，动物回归试验、血清交叉中和试验和消毒药杀毒试验。结果四株IBV EID50分别为TX1：10<'-5.3> EID50、TX2： 10<'-6.4>EID50、PG3：10<'-4.5> ElD50、DB4：10<'-6.7>EID50，四株毒抗本毒株血清的中和效价最高(1:512)，TX1、PG3与抗H120血清的中和效价较高(1:64)，其次为抗H52的血清(1:32)，表明有一定的抗原交叉性，与W93抗血清的中和反应性均较低(1:8～1:16)，相关性较差。四株毒均对碘伏、84消毒药敏感，动物回归感染死亡鸡肾脏病变明显，表现肾脏肿大、花斑肾，卡他性支气管炎。 RT-PCR方法扩增4株IBv分离株的S1基因，结果显示，S1基因的长度由1657-1669个核苷酸组成，编码552-556个氨基酸残基，S基因推导氨基酸切割识别位点序列分别为TX1(RRF3、R)、TX2(RRFRR)、DB4(HRRRR)，TX1的识别位点与参考株均不相同。与国内外18株参考毒S1基因序列分析发现：分离株与国内疫苗株、国外变异株及标准株核苷酸、氨基酸同源性均在77％以下，而与国内分离株LX4、JX9901同源性高达91％以上，与参考毒株的S1基因系统进化树分析比较显示，分离株与JX9901、LX4、BJ、IBZ-V国内流行株在第1大群内， TX1、TX2与JX9901构成该群的第一个分支，氨基酸同源性在91％～99％之间，DB4与BJ、IBZ-V、LX4构成第二个分支，氨基酸同源性在81％～87％之间，亲缘关系较近，而与其它3个大群国内疫苗株、国外变异株及标准株氨基酸的同源性较低，在亲缘关系上较远。分离株与这些参考株之间发生了较大的变异。由此可见，分离株与疫苗株氨基酸的低同源性及分离株S1基因在高变区内的缺失、插入和点突变是导致免疫鸡群发病的主要原因。

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作者
崔德凤;
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作者单位

中国农业大学;

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授予单位中国农业大学;
学科预防兽医学
授予学位硕士
导师姓名夏春;
年度 2006
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类微生物鉴定;
关键词
鸡传染性支气管炎; 冠状病毒科; 变异株; 分离鉴定; S1基因; 基因序列分析;

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