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南方鲇和罗非鱼生长激素受体(GHR2)的克隆和两种生长激素受体在南方鲇表达的初步研究

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第一章前言

第二章南方鲇和罗非鱼GHR2 cDNA的分子克隆和序列分析

第三章南方鲇GHR1和GHR2组织分布和基因表达的调节

结束语

参考文献

致 谢

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摘要

本文通过RT-PCR和RACE结合的方法从南方鲇和罗非鱼肝脏中成功克隆得到了生长激素受体2(GHR2)全长cDNA序列,证实了鱼类存在两个GHR。南方鲇GHR2(scGHR2)cDNA全长为2299bp,包括5'端420bp的非编码区,1659bp的蛋白质编码区和3'端220bp的非编码区。开放阅读框编码553个氨基酸。罗非鱼GHR2(nGHR2)cDNA全长为1896bp,包括5'端39bp的非编码区,1722bp的蛋白质编码区和3'端135bp的非编码区。开放阅读框编码574个氨基酸。scGHR2和nGHR2都有传统GHR1的一些特征区域,包括胞外铰链区FG(D/E)FS基序、胞内极其保守的Box1和Box2结构域以及一些保守的胞外半胱氨酸残基和胞内酪氨酸残基。但是分析南方鲇和罗非鱼GHR2与GHR1序列发现,它们各自具有一些特点,使彼此区别开来,主要包括(1)胞外半胱氨酸残基数:GHR1胞外通常有7个半胱氨酸残基,形成3个二硫键,而GHR2只有4-5个半胱氨酸残基,可能形成两个二硫键。(2)胞内酪氨酸残基数:GHR1胞内通常有8个酪氨酸残基,而GHR2只有5个。总体来说,GHR2与GHR1序列相似性较低。在氨基酸水平上,scGHR2和scGHR1的序列相似性为36.0%,nGHR2和nGHR1的序列相似性为35.9%。

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