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【6h】

炎症促进NPC1表达加重高脂负荷下肾系膜细胞胆固醇积聚致细胞损伤机制研究

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英汉缩略语名词对照表

前言

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞系

1.1.2 主要试剂

1.1.3 主要仪器

1.1.4 主要试剂的配置

1.2 方法

1.2.1 低密度脂蛋白(LDL)的分离和纯化

1.2.2 人肾脏系膜细胞HMCs的培养

1.2.3 HMCs的复苏

1.2.4 HMCs的冻存

1.2.5 HMCs的分组

1.2.6 免疫印迹法(Western Blot)检测蛋白表达

1.2.7 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)

1.2.8 细胞免疫荧光

1.2.9 普利莱胆固醇检测试剂盒测细胞内总胆固醇

2 结果

2.1 各组HMCs NPC1的表达

2.1.1 实时荧光定量PCR及Western Blot检测NPC1 mRNA及蛋白的表达

2.1.2 免疫荧光检测NPC1蛋白的表达

2.2 NPC1/LAMP-1免疫荧光共定位

2.3 各组细胞内总胆固醇及内质网胆固醇浓度

2.4 各组HMCs GRP78、PEKR、ATF6、FN、Col Ⅳ mRNA的表达

2.5 免疫荧光检测GRP78及FN的表达

2.6 各组HMCs的增殖能力

2.7 各组HMCs细胞周期分布

2.8 u18666a干预后内质网胆固醇,GRP78、FN、Col Ⅳ mRNA,细胞增殖和周期等的变化

3 讨论

参考文献

全文小结

文献综述:C型尼曼匹克蛋白1(NPC1)在脂代谢紊乱中的作用

致谢

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