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不同微泡浓度对HIFU治疗后残留肝癌组织中HSV1-TK基因表达的影响

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摘要

目的:高强度聚焦超声(HIFU)治疗VX2兔肝癌后,给予不同浓度脂质微泡包裹的HSV1-TK基因,观察不同微泡浓度对残留肝癌组织中TK基因表达的影响,以获得最佳转染微泡浓度。
   方法:将20只经HIFU治疗后的VX2兔肝癌模型随机分成4组,即A组:浓度为0.025 mg/ml的携基因微泡;B组:浓度为0.05 mg/ml的携基因微泡;C组:浓度为0.075 mg/ml的携基因微泡;D组:浓度为0.1 mg/ml的携基因微泡。按5 ml/kg经兔耳缘静脉注入携基因超声微泡,同时超声基因转染治疗仪辐照靶区,辐照条件为300 KHz,2W/c㎡,辐照10 s,间隔10 s,共20 min。于超声辐照后48 h处死各组大白兔,RT-PCR检测TK基因在兔残留肝癌组织中的表达,免疫组织化学法检测兔残留肝癌组织中TK蛋白的表达。
   结果:免疫组化结果:B、C、D组与A组比较,TK表达增强,差异具有显著性(p<0.05),C、D组与B组比较,TK表达增强(p<0.05),而C、D两组TK表达的比较无统计学意义(p>0.05)。半定量RT-PCR分析残留肝癌组织内TK mRNA的表达:与A组相比,B、C、D组中的TK基因表达增强,差异具有显著性(p<0.05),C、D组与B组比较,TK表达增强(p<0.05),而C、D两组TK mRNA表达的比较无统计学意义(p>0.05)。
   结论:当携基因微泡浓度<0.075 mg/ml时,TK mRNA、蛋白的表达与微泡呈浓度依赖,而当携基因微泡浓度>0.075 mg/ml时,基因的表达与微泡浓度无相关性,故携基因的微泡最适浓度为0.075 mg/ml。本研究结果为后续研究提供了实验依据。

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