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甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2与糖尿病肾病

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第一部分实验

前言

试验材料与方法

1材料

2研究对象

3.研究方法与步骤

4 统计学分析

结果

1.正常对照组和2型糖尿病组的一般资料的比较

2.双向电泳后ImageScannerIII凝胶成像系统胶扫描

3. 2-DE图谱分析

讨论

第二部分实验

前言

试验材料与方法

1材料

2研究对象

3.研究方法与步骤

4 统计学分析

结果

1. 正常对照组和2型糖尿病组的一般资料的比较

2.正常对照组与2型糖尿病患者之间MASP2水平比较

3.正常对照组与2型糖尿病肾病组之间MASP2水平的比较

4.正常对照组与2型糖尿病患者之间MBL水平比较

5.正常对照组与2型糖尿病肾病组之间MBL水平比较

6.总的结果:

讨论

结论

参考文献

综述:凝集素途径与糖尿病肾病

资金项目

致谢

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摘要

目的::
  (1)应用血清蛋白质组学探讨糖尿病肾病(Diabetic Nephropathy,DN)发生发展机制。
  (2)验证甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MBL associated serine protease2,MASP2)在糖尿病肾病不同阶段的表达水平。
  (3)探讨甘露聚糖结合凝集素(mannose binding lectin,MBL)与2型糖尿病肾病的关系。
  方法:
  第一部分:入选年龄、性别匹配研究对象共4组,每组8人。组A为正常对照组,组B、C、D分别为2型糖尿病尿微量白蛋白排泄率(UAER)﹤30mg/g肌酐组、30mg/g肌酐≤UAER﹤300mg/g肌酐组、UAER≥300mg/g肌酐组。利用双向电泳对4组血清进行蛋白质分离。应用ImageMaster2D Platinum分析软件(GE公司)分析四组之间差异表达的蛋白质点。挖取表达差异蛋白质点,进行基质辅助激光解附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析,并与SwissProt数据库进行匹配鉴定蛋白质。
  第二部分:入选正常对照组(A组)54人,2型糖尿病患者尿微量白蛋白<30mg/g肌酐组(B组)52人、尿微量白蛋白≥30mg/g肌酐且<300mg/g肌酐组(C组)30人、尿微量白蛋白≥300mg/g肌酐组(D组)16人。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)来检测4组血清MASP2水平,验证血清蛋白质组实验结果。同时应用ELISA方法检测以上四组血清MBL水平。并分析MASP2和MBL与2型糖尿病慢性并发症的关系。
  结果:
  第一部分:血清蛋白质组学结果显示,在2型糖尿病B组患者中MASP2表达上调。
  第二部分:ELISA实验结果显示:
  (1)2型糖尿病组MASP2水平高于正常对照组(P<0.05);
  (2)2型糖尿病B组B组和D组的MASP2表达高于C组(P<0.05);
  (3)MBL在正常对照组与糖尿病组没有差别(P>0.05),不同糖尿病肾病组没有差别(P>0.05)。
  结论:
  (1)2型糖尿病患者甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2水平升高。
  (2)MASP2可能参与2型糖尿病肾病的发生发展.

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