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阿糖腺苷的研究——发酵、分离纯化、结构鉴定及单磷酸阿糖腺苷合成

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前 言

第一章发酵工艺的优化

1材料和方法

1.1 菌株

1.2培养基

1.3培养方法

1.4检测方法

2 结果与讨论

2.1发酵培养基的优化

2.2发酵条件的优化

2.3 讨论

第二章 阿糖腺苷的分离纯化与结构鉴定

1材料和方法

1.1 菌株

1.2培养基

1.3发酵培养

1.4仪器

1.5 HPLC检测条件

2结果与讨论

2.1阿糖腺苷的提取、分离和纯化

2.2 理化性质和结构鉴定

2.3 结果

2.4讨论

第三章 液相色谱-质谱联用分析发酵液中的阿糖腺苷及其有关物质

1材料和方法

1.1仪器与试剂

1.2 方法

1.3溶液的制备

2结果与讨论

2.1方法学考察

2.2 结果

2.3 讨论

第四章 单磷酸阿糖腺苷的合成

1材料和方法

1.1材料

1.2主要仪器

1.3 检测方法

1.4合成路线

2实验部分

2.1单磷酸阿糖腺苷的合成

2.2单磷酸阿糖腺苷的精制

3结果与讨论

3.1理化性质和结构鉴定

3.2讨论

第五章总结

参考文献

致谢

附图

综述

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摘要

阿糖腺苷属于核苷类抗病毒药物,具有广谱的抗病毒作用,临床上已广泛用于治疗疱疹病毒、巨细胞病毒以及乙型肝炎病毒引起的疾病。 本研究通过微生物发酵法制得阿糖腺苷,并采用正交实验设计,优化发酵工艺。优化后的工艺为:半乳糖4.0%,黄豆粉5.0%,玉米浆粉1.0%,硫酸铵0.2%,硝酸钠0.5%,碳酸钙0.25%,种龄36h,接种量5%,装液量40mL/500mL,转速为220rmp·min-1,32℃发酵120h。阿糖腺苷的效价从原来的500μg·mL-1提高到现在的2082μg·mL-1,提高了近4倍。 本研究同时还建立了液相色谱-电喷雾离子-质谱联用技术分析发酵液中阿糖腺苷及其有关物质,采用柱层析法对发酵产物中的阿糖腺苷进行分离纯化,并运用UV、IR、LC-MS和NMR对其进行结构鉴定。 直接以阿糖腺苷为原料,对其进行磷酸化,通过精制纯化,得到水溶性更大的单磷酸阿糖腺苷,并采用HPLC、UV、IR、LC-MS和NMR等对其结构进行鉴定。

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