细胞周期进程中Cx43蛋白和AKAP95蛋白相互作用关系的研究

声明

摘要

缩略词表

第1章 前言

1．1 细胞周期

1．1．1 细胞周期的不同时相

1．1．2 细胞同步化

1．1．3 细胞周期阻断试剂

1．2 Cx43蛋白

1．3 AKAP95蛋白

1．4 PKA

1．5 本论文的目的、研究内容和意义

第2章 A549细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期进程中相互作用关系的研究

2．1 实验材料

2．1．1 实验细胞株

2．1．2 主要试剂及耗材

2．1．3 主要仪器及设备

2．1．4 主要溶液的配制

2．2 实验方法

2．2．1 细胞的培养

2．2．2 免疫荧光

2．2．3 细胞周期阻断试剂处理细胞

2．2．4 流式细胞术测定细胞周期

2．2．5 分离细胞浆蛋白与细胞核蛋白

2．2．6 测定蛋白浓度

2．2．7 Western Blot

2．2．8 免疫共沉淀

2．3 结果

2．3．1 免疫荧光激光共聚焦显微镜检测A549细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期的各个时相下的定位与共定位

2．3．2 细胞周期阻断试剂的阻断效果

2．3．3 细胞浆蛋白和核蛋白分离

2．3．4 绘制标准蛋白曲线

2．3．5 A549细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期的各个时相下的表达

2．3．6 A549细胞中细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期的各个时相下的相互作用结合关系

2．4 讨论

第3章 L-O2细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期进程中相互作用关系的研究

3．1 实验材料

3．1．1 实验细胞株

3．1．2 主要试剂及耗材

3．1．3 主要仪器及设备

3．1．4 主要溶液的配制

3．2 实验方法

3．2．1 细胞培养

3．2．2 细胞周期阻断试剂处理L-O2细胞

3．2．3 流式细胞术测定细胞周期

3．2．4 免疫荧光

3．2．5 Western Blot

3．2．6 免疫共沉淀

3．3 结果

3．3．1 L-O2细胞中四种细胞周期阻断试剂的阻断效果

3．3．2 L-O2细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期的各个时相下的表达

3．3．3 L-O2细胞中Cx43蛋白和AKAP95蛋白在细胞周期的各个时相下的相互结合关系

3．4 讨论

3．5 结论

第4章 PKA活性对A549细胞周期进程中Cx43蛋白与AKAP95蛋白相互作用的研究

4．1 实验材料

4．1．1 实验标本收集

4．1．2 主要试剂及耗材

4．1．3 主要仪器及设备

4．1．4 主要溶液的配制

4．2 实验方法

4．2．1 细胞爬片

4．2．2 A549细胞的PKA活性处理

4．3 结果

4．3．1 细胞免疫荧光激光共聚焦显徽镜检测PKA的活性对细胞周期进程中Cx43蛋白与AKAP95蛋白的定位与共定位的影响

4．4 讨论

4．5 结论

参考文献

致谢