• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文学位 >裂殖酵母中Dntl在有丝分裂早期抑制SIN信号通路负调控因子Dmal的功能研究
【6h】

裂殖酵母中Dntl在有丝分裂早期抑制SIN信号通路负调控因子Dmal的功能研究

代理获取
页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

人类肿瘤抑制因子Chfr是一种E3泛素连接酶，当细胞受到不良条件刺激(如微管解聚药物等)时，Chfr可以阻止细胞进入有丝分裂。然而，人们目前还不清楚Chfr的功能是否也受到调控。Dma1是Chfr在裂殖酵母中的同源蛋白，两者在序列上存在一定的相似性。已有的研究表明，Dma1在有丝分裂晚后期负调控有丝分裂的退出(mitotic exit)和胞质分裂(cytokinesis)。最近，为了进一步研究Dma1的功能，我们实验室通过串联亲和纯化(tandem affinity purification，TAP)的方法在裂殖酵母细胞中纯化了Dma1蛋白复合物，并配合质谱分析的方法鉴定出与Dma1一起被纯化的蛋白，其中检出了一个丰度很高的蛋白Dnt1。
　　 在本研究中，我们利用免疫共沉淀技术证实了Dma1与Dnt1在细胞内存在相互作用。同时，我们还发现这两种蛋白之间的相互作用分别依赖于Dma1的FHA结构域与Dnt1中央区域的一段氨基酸。另外，Dma1结合被磷酸化的Dnt1，二者的相互作用在有丝分裂中期达到最强。
　　 我们进一步利用遗传学与细胞生物学等手段对有丝分裂中期Dma1与Dnt1的相互作用进行了研究，期望发现两者在功能上的联系。几方面的结果显示，在有丝分裂中期，Dnt1具有抑制Dma1活性的功能。首先，在缺失dnt1+基因的细胞中过量表达Dma1引起纺锤体极体(spindle pole body，SPB)结构的破坏和纺锤体形成的缺陷，最终导致细胞被阻断在有丝分裂中期，并且这种阻断依赖于纺锤体组装检验点(spindle assembly checkpoint，SAC)。其次，dma1+基因的缺失可以部分逆转dnt1Δ细胞中SPB功能的异常。该现象表明，缺失dnt1+基因的细胞中有丝分裂缺陷的表型可能是由于Dma1过度激活所造成的。最后，我们发现Dnt1能够影响Dma1在SPB上的定位但并不影响Dma1的蛋白水平。
　　 综上所述，本研究表明Dnt1在有丝分裂早期对于Dma1的活性具有一定的抑制作用，这有利于保证SPB和纺锤体的正常组装及有丝分裂的正常进行。鉴于裂殖酵母中的Dma1是哺乳动物中Chfr的同源蛋白，对于Dma1的深入研究将加深我们对于Chfr的功能的认识。

著录项

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利
代理获取

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号