声明
第一章 前言
1.1 铅
1.1.1 铅的性质
1.1.2 铅的污染现状
1.1.3 铅的吸收与代谢
1.1.4 铅的毒性效应
1.1.5 铅发挥毒性效应的机制
1.2 线粒体自噬
1.2.1 线粒体自噬概述
1.2.2 线粒体自噬的机制
1.3 内质网应激
1.3.1 内质网应激概述
1.3.2 内质网应激信号通路与自噬
1.4 铅与线粒体自噬
1.5 铅与内质网应激
1.6 内质网应激与线粒体自噬的关系
1.7 研究目的与意义
1.8 实验技术路线
第二章 材料与方法
2.1 实验材料
2.1.1 细胞系
2.1.2 主要试剂及抗体
2.2 实验仪器与设备
2.3 主要实验试剂的配制
(1)DMEM培养基的配制
(2)1×PBS
(3)0.25%胰蛋白酶
(4)1 M Pb(Ac)2
(11)1×Tris-甘氨酸转膜液
(12)5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液
(13)5%脱脂牛奶
(14)DMEM完全培养基
(15)SDS-PAGE分离胶与浓缩胶的制备
2.4 实验方法
2.4.1 细胞培养
2.4.2 细胞复苏
2.4.3 细胞传代
2.4.4 细胞冻存
2.4.5 细胞计数
2.4.6 CCK8检测细胞活力
2.4.7 LDH检测细胞损伤
2.4.8 免疫印迹实验
2.4.9 数据统计与分析
第三章 结果
3.1 Pb(Ac)2对HEK293细胞活力的影响
3.2 Pb(Ac)2对HEK293细胞损伤的影响
3.3 Pb(Ac)2诱导HEK293细胞发生线粒体自噬
3.4 Pb(Ac)2诱导HEK293细胞发生内质网应激
3.5 Pb(Ac)2通过激活内质网应激诱导线粒体自噬
3.5.1 4-PBA对Pb(Ac)2诱导内质网应激的影响
3.5.2 内质网应激对Pb(Ac)2诱导线粒体自噬的影响
第四章 讨论
4.1 Pb(Ac)2对细胞的毒性效应
4.2 Pb(Ac)2对线粒体自噬和内质网应激的影响
4.3 内质网应激对Pb(Ac)2诱导的线粒体自噬的影响
第五章 结论与展望
5.1 主要结论
5.2 研究展望
参考文献
在学期间的研究成果
附录
致谢