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第一部分前言
一双光子激光共聚焦荧光显微镜
1 双光子激光共聚集荧光显微镜的理论基础——双光子吸收
2 TPM的仪器构造
3 TPM的基本特性
4 TPM实际应用中的优势
二双光子激光共聚焦荧光显微镜的应用进展
1单分子成像和检测
2薄样本和敏感系统中的应用
3用于多标记样本
4成像厚生物样本
5定点光活化笼锁化合物
6研究深组织中的生命功能网络
7非干扰性的观察胚发育
8医疗诊断上的应用
三双光子荧光探针
1双光子荧光探针的基本特性
2双光子荧光探针的发光机理
3双光子荧光探针的研究现状
四本论文研究的目的和意义
第二部分材料及方法
一实验材料
1待测试的双光子荧光探针和参比探针
2光谱测试的实验材料和仪器
3动物细胞培养的实验材料和仪器
4拟南芥愈伤组织原生质体制备的材料和仪器
5细胞毒性分析的实验材料和仪器
二实验方法
1双光子荧光探针的光谱分析
2染色样本的制备方法
3染色成像的实验方法
4细胞毒性分析的实验方法
第三部分实验结果
一咔唑系列核成像双光子荧光探针的设计
二咔唑系列荧光探针与DNA相互作用的研究
1咔唑系列荧光探针与DNA作用的光谱分析
2环境极性对咔唑系列荧光探针荧光光谱的影响
3粘度对咔唑系列荧光探针光谱的影响
三计算咔唑系列荧光探针的物理参数
1咔唑系列荧光探针的荧光量子产率
2咔唑系列荧光探针与DNA作用的结合常数和结合位点数
3固定激发波长下不同环境中咔唑系列荧光探针的双光子吸收截面和活性吸收截面
4咔唑系列荧光探针波长依赖的双光子吸收截面谱和活性吸收截面谱
四咔唑系列荧光探针的成像特性
1 BMVC和9E-BHVC的细胞定位
2 9E-BHVC作为核定位染料的广谱适用性
3 9E-BHVC具有双光子激光激发的敏感性
4 PH对9E-BHVC染色的影响
5 9E-BHVC的染色速率和光稳定性
6 9E-HVC和9E-BHVC的活细胞染色
7 9E-BHVC的活细胞染色效率
8 9E-BHVC长时间孵育HeLa细胞的染色结果
9捕捉HeLa细胞有丝分裂相
10凋亡药物处理后9E-BHVC染色细胞
11 9E-BHVC染色植物原生质体
五BMVC和9E-BHVC的短期细胞毒性实验
第四部分讨论
一A-π-D-π-A型共轭结构在荧光探针的设计中的应用
二咔唑系列荧光探针与DNA相互作用的复杂性
三乙基和羟乙基引入带来的结果
四9E-BHVC是具有双生物学窗口的荧光探针
五咔唑系列荧光探针具有作为环境荧光探针的潜力
六9E-BHVC作为双光子核成像探针在细胞水平的成像潜力
小结：
参考文献：
第六部分图版
第七部分附录
博士期间所取得的研究成果
致谢
