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石斛参芪口服液的制备、质控及其对免疫系统功能的药效学研究

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前言

第一章 石斛参芪口服液制备工艺研究及其相关质量检查

1 实验材料

2 实验方法及结果

3 讨论

第二章 石斛参芪口服液对小鼠免疫功能的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

4 讨论

第三章 石斛参芪口服液多糖对ConA诱导的小鼠细胞因子mRNA表达的影响

1 实验材料

2 实验方法

3 结果

4 讨论

结论

后续研究

参考文献

综述:中药在细胞因子水平调节免疫功能的研究进展

致谢

作者简介

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摘要

目的：石斛参芪口服液是本课题组依据中医基础理论自拟复方，并采用现代制剂工艺研发的针对免疫系统功能调节的保健品。本课题的主要任务是研究该产品的制备工艺及产品质量分析，并在此基础上对该产品的免疫系统调节功能进行药效学考察及初步的药理学机制研究。为开发出质量可靠、功效明确的成熟产品奠定基础。
　　方法：1.处方量石斛、党参、黄芪，采用水回流提取法提取后，合并提取液，过滤后浓缩至100 mL即得。本部分实验将以总多糖的含量为考察指标，在单因素实验的基础上采用L9(34)正交实验优化石斛参芪口服液制备过程中提取参数（提取时间、料液比、提取次数、提取温度、pH环境等）。
　　2.本部分研究将从原材料质量控制、产品性状检查、产品有效成分的鉴别及含量测定等方面对口服液质量进行控制。石斛、黄芪、党参等原料药材质量按照《中国药典》规定，采用薄层色谱法进行质控。针对制成品，将考察其pH值、相对密度等基本性状。在上述基础之上，以本产品主要有效物质总多糖为指标对口服液进行含量测定，规定产品有效成分含量标准范围。
　　3.考察不同剂量下的石斛参芪口服液对小鼠免疫系统功能的药效学作用。1）采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验观察石斛参芪口服液对小鼠非特异性免疫功能的影响，并测定脾脏、胸腺指数；2）采用ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验观察石斛参芪口服液对小鼠细胞免疫功能的影响；3）采用半数溶血值（HC50）实验考察石斛参芪口服液对小鼠体液免疫功能的影响。
　　4.石斛参芪口服液对免疫系统作用的药理学机制初步研究。采用实时定量聚合酶链式反应技术（RT-PCR）法研究石斛参芪口服液中多糖成分对小鼠脾脏淋巴细胞免疫因子IL-1β、IL-2、IFN-γ、IL-1α、IL-3等基因表达的影响。
　　结果：1.优化制备工艺为：用40倍的水在80℃回流提取3次，每次提取2.5 h。合并提取液，过滤后浓缩至100 mL，加入苯甲酸钠（0.2％），灭菌装瓶即得。
　　2.石斛参芪口服液，产品应选用符合中国药典标准的石斛、党参、黄芪为原料。按本文制备工艺所得石斛参芪口服液外观应呈红棕色、色泽均一、无白点及其他异物、无异味，有少许沉淀但轻摇即散。制成品pH值应在4-5左右以保证稳定性。相对密度应介于1.09～1.13之间。口服液按中国药典中石斛、黄芪、党参薄层色谱鉴别法，在相应位置，应有石斛碱、黄芪甲苷、党参炔苷阳性斑点。口服液中粗多糖含量应为44.63%±0.4%。
　　3.对免疫系统的药效学研究。在针对体液免疫功能、细胞免疫功能、巨噬细胞免疫功能的药效学试验中，中、高剂量组石斛参芪口服液表现出显著的药效。此外，高、中、低三个剂量均对吞噬指数有显著性改变。
　　4.在药理学机制考察中发现，石斛参芪口服液可以显著提高IL-1β，IL-2，IFN-γ，IL-1α，IL-3等免疫因子的基因表达。
　　结论：本课题建立了石斛参芪口服液的制备工艺，建立了稳定可控的质量标准。并在此基础之上，证明了石斛参芪口服液对免疫系统功能的明确药效。本课题更进一步的证明了IL-1β，IL-2，IFN-γ，IL-1α，IL-3等免疫因子的调控可能是石斛参芪口服液口服液产生药效的机制之一。本课题的研究成果证明了石斛参芪口服液口服液设计合理、标准可控、疗效明确，作用机制符合现代药理学原理，是一种值得进一步开发的中药复方新品种。

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