组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体兔左心耳内靶向溶栓研究

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目的：了解组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因逆转录病毒载体局部转导对特氟隆(Dacron)片的溶血栓作用。
　　方法：70只健康大耳白兔(南京医科大学动物实验室提供)建立左心耳内Dacron涤纶片植入后形成血栓模型，随机分为PLEGFP-N1-tPA治疗组(n=30)、PLEGFP-N1空白载体对照组(n=20)、完全空白对照组(n=20)，局部用基因转导，在术后2天、75天各组用一半动物取材(共6个亚组分别为A1、B1、C1、A2、B2、C2)，聚光共聚焦(confocal)显微镜观察所取左心耳组织增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达，电视镜和体视镜观察Dacron片表面形成血栓情况，用免疫印迹(Western blot)、酶联免疫吸附实验(ELISA)和血浆平板分别检测所取组织tPA表达、溶栓、含量及其活性变化并比较结果。
　　结果：术后2天和75天分别取材，治疗组所取左心耳组织聚光共聚焦显微镜下均观察到多而强的EGFP增强萤光表达，Plegfp-N1对照组也有EGFP增强萤光表达，但空白对照组无EGFP增强型萤光表达。70个Dacron涤纶片加上未植入组10个Dacron涤纶片共80个，在体视镜(×160倍)和电镜(×500倍)下观察，治疗组和未植入组Dacron涤纶片表面均无血栓，对照组涤纶片表面观察到均有血栓。治疗组所取血样标本Western blot检测均有外源tPA表达，而对照组未检测到。血浆平板检测显示：治疗组均有明显的溶解圈，有较强溶栓作用，而对照组没有；根据蚓激酶计算出的纤溶活性结果显示：治疗组后2天和75天所取组织tPA活性分别为(540.62±10.05)、(548.50±11.75)U/g，两时间点比较，差异无统计学意义(P>0.05)。术后2天和75天治疗组、两对照组中6个亚组所取左房组织tPA含量分别为(A1743.24±11.39)、(B130.88±5.41)、(C129.91±5.69)、(A2744.67±11.86)、(B233.05±6.46)、(C231.74±5.83)ng/g，治疗组结果明显高于对照组(P<0.01)；治疗组中2天、75天两时间点比较，tPA含量差异无统计学意义(P>0.05)。
　　结论：Plegfp-N1-tPA局部基因转导可以有效阻止外源移植物涤纶片表面血栓形成。

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作者
罗洪波;
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作者单位

遵义医学院;

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授予单位遵义医学院;
学科心胸外科学
授予学位硕士
导师姓名向道康;
年度 2012
页码
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原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类心脏;
关键词
逆转录病毒科; 纤溶酶原激活剂; 基因治疗; 溶血栓作用;

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