几种药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物生物活性研究

声明

摘要

第1章 绪论

1．1 植物内生真菌研究概况

1．1．1 植物内生真菌的定义

1．1．2 植物内生真菌的研究现状

1．1．3 植物内生真菌的生物多样性

1．1．4 植物内生真菌活性成分结构分类

1．1．5 结语

1．2 七种药用植物研究现状

1．2．1 植物冬凌草的研究现状

1．2．2 植物丹参的研究现状

1．2．3 植物荨麻的研究现状

1．2．4 植物大蓟的研究现状

1．2．5 植物铁棒锤的研究现状

1．2．6 植物鹿蹄橐吾的研究现状

1．2．7 植物平贝母的研究现状

1．3 生物活性研究的目的及意义

1．3．1 植物内生真菌抗肿瘤活性研究的目的及意义

1．3．2 植物内生真菌抗单胺氧化酶活性研究的目的及意义

1．3．3 植物内生真菌抗乙酰胆碱酯酶活性研究的目的及意义

1．4 本论文研究流程图

第2章 药用植物内生真菌的分离及纯化

2．1 实验所需材料及仪器

2．1．1 植物样品来源

2．1．2 药品及试剂

2．1．3 实验仪器

2．1．4 平面及斜面培养基

2．2 实验方法

2．2．1 植物内生真菌的分离纯化及保存

2．2．2 初步鉴定内生真菌的形态学

2．2．3 结果对比与分析

第3章 药用植物内生真菌次生代谢产物粗提物的抗肿瘤、抗单胺氧化酶及抗乙酰胆碱脂酶活性的研究

3．1 引言

3．2 实验所需材料及仪器

3．2．1 待测菌株

3．2．2 培养基

3．2．3 检测用细胞株及动物

3．2．4 药品、试剂及仪器

3．3 实验方法

3．3．1 菌株发酵及次生代谢提取物的制备

3．3．2 抗肿瘤活性检测

3．3．3 抗单胺氧化酶活性检测

3．3．4 抗乙酰胆碱酯酶活性检测

3．4 结果对比与分析

3．4．1 抗肿瘤活性

3．4．2 抗单胺氧化酶活性

3．4．3 抗乙酰胆碱酯酶(AChE)活性检测结果

3．5 讨论

第4章 DLC-4菌株和DJ-3菌株化学成分及生物活性研究

4．1 材料及仪器

4．1．1 培养基

4．1．2 菌株

4．1．3 实验动物

4．1．4 仪器

4．1．5 药品及试剂

4．2 实验方法

4．2．1 菌株DLC-4发酵液乙酸乙酯萃取物化学成分研究

4．2．2 菌株DJ-3发酵液乙酸乙酯萃取物化学成分研究

4．2．3 抗单胺氧化酶活性检测

4．2．4 抗乙酰胆碱酯酶活性检测

4．3 结果与分析

4．3．1 DLC-4发酵液乙酸乙酯萃取物中化合物的结构鉴定

4．3．2 菌株DJ-3发酵液乙酸乙酯萃取物中化合物的结构鉴定

4．3．3 抗单胺氧化酶活性检测结果

4．3．4 抗乙酰胆碱酯酶活性检测结果

4．4 讨论

第5章 DLC-4菌株和DJ-3菌株的分子生物学鉴定

5．1 实验所需材料及仪器

5．1．1 培养基

5．1．2 待测菌株

5．1．3 实验仪器

5．1．4 药品及试剂

5．2 实验方法

5．2．1 菌丝体的扩大培养

5．2．2 菌丝体DNA的提取

5．2．3 DNA纯度的检测

5．2．4 ITS-PCR扩增

5．2．5 扩增产物的纯化及序列的测定

5．2．6 扩增产物序列的分析

5．3 结果与分析

5．4 讨论

结论

参考文献

致谢

附录A (攻读硕士学位期间所发表的论文及成果)