激光显微切割从组织切片中提取单个细胞进行PCR的方法探讨

代理获取

页面导航

目录
摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

【目的】探讨应用激光捕获显微切割从石蜡切片和冰冻切片中进行单个细胞分离和聚合酶链反应(PCR)技术在方法学上的可行性，为进一步将该技术用于霍奇金淋巴瘤的深入研究奠定基础。【方法】采用激光捕获显微切割对46例淋巴结反应性增生石蜡组织和2例淋巴结反应性增生冰冻组织，进行单个细胞分离和聚合酶链反应(PCR)。采用蛋白酶K消化提取DNA，选取β-珠蛋白基因引物进行聚合酶链反应(PCR)及EB染色技术，采用凝胶成像图像分析系统进行分析。首先对从100个淋巴细胞提取的DNA进行扩增，出现阳性结果后再逐次递减，最后对单细胞提取的DNA进行扩增，并对结果进行综合分析。统计学方法：各组间差异采用X2检验，P＜0.05表示差异有显著性。【结论】证实了应用激光捕获显微切割从组织切片上进行单个细胞分离和PCR在方法学上的可行性，说明从组织切片中进行单细胞分离和PCR具有较好的扩增效率和特异性。组织切片上提取单个细胞的PCR扩增效率，冰冻组织明显优于石蜡包埋组织；细胞大小和切片厚度是影响扩增效率的重要因素；单细胞PCR扩增效率与初始PCR模板的制备方法密切相关。

著录项

作者
张玉华;
展开▼
作者单位

遵义医学院;

展开▼
授予单位遵义医学院;
学科病理学
授予学位硕士
导师姓名刘庆荣,邓飞;
年度 2005
页码
总页数
原文格式 PDF
正文语种中文
中图分类激光疗法;肿瘤病理解剖学、组织学;
关键词
激光捕获显微切割; 单细胞分离; 聚合酶链反应; 淋巴结反应性增生;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 激光捕获显微切割技术在制备不同组织切片中的应用 [J] . 王振宁 ,徐惠绵 ,姜莉 . 临床与实验病理学杂志 . 2004,第004期
2. 用于激光捕获显微切割的组织冰冻切片制作方法探讨 [J] . 段仁杰 ,林爱琴 ,汪根莲 . 皖南医学院学报 . 2016,第001期
3. 激光显微切割技术用于子宫内膜异位组织DNA的提取及其完整性分析 [J] . 赵路阳 ,李小雷 ,张燕 . 生物技术通讯 . 2013,第005期
4. 手工显微切割在眼科组织切片中的应用研究 [J] . 陈晨 ,卢国华 . 常州实用医学 . 2014,第006期
5. 激光显微切割-单细胞PCR技术在霍奇金淋巴瘤IgH基因检测中应用 [J] . 匡晓燕 ,古杰鸣 ,王守峰 . 临床与实验病理学杂志 . 2008,第001期
6. 应用激光捕获显微切割肺癌组织的体会 [C] . 刘英 ,邓征浩 ,文继舫 . 中华医学会病理学分会2011年全国病理技术新进展研讨会 . 2011
7. 应用激光捕获显微切割及单细胞PCR研究霍奇金淋巴瘤肿瘤细胞 [A] . 匡晓燕 . 2006

激光显微切割从组织切片中提取单个细胞进行PCR的方法探讨

目录

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅