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加减归肾方结合针刺治疗抗精子抗体阳性不孕症的研究

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目录

声明

引言

第一章 文献研究

1.1 中医对不孕的认识

1.1.1 免疫性不孕症的病因病机

1.1.2 免疫性不孕的辨证施药

1.1.3 中西医结合治疗

1.1.4 经验方治疗

1.1.5 古方运用

1.1.6 针刺与免疫性不孕不育

1.1.7 加减归肾方与免疫性不孕不育

1.2 西医对免疫性不孕的认识

1.2.1 免疫性不孕的相关因素

1.2.2 西医对AsAb阳性不孕症的治疗

1.3 本研究的相关工作基础

第二章 临床研究

2.1 资料与方法

2.1.1 临床资料

2.1.2 诊断标准

2.1.3 纳入标准

2.1.5 研究方案

2.1.6 实验材料

2.1.7 标本采取及指标测定

2.1.8 数据统计学处理

2.2 结果与分析

2.2.1 中药组与针药组患者一般资料对比

2.2.2 中药组与针药组治疗后受孕情况比较

2.2.3 中药组与针药组治疗前后AsAb转阴率比较

2.2.4 中药组与针药组临床疗效比较

2.2.5 中药组与针药组治疗前后β-EP、 ENK的变化比较

2.3 讨论

2.3.1 免疫性不孕症的主要发病机制之一是肾虚

2.3.2 加减归肾方组方分析

2.3.3 针刺取穴依据及分析

2.3.4 β-EP、ENK的免疫调节作用

2.4 结论

第三章 实验研究

3.1 资料与方法

3.1.1 实验动物

3.1.2 饲料

3.1.3 药品及主要试剂

3.1.4 主要实验器材

3.1.5 主要药物及试剂的配制

3.1.6 抗精子抗体阳性动物模型制备

3.1.7 给药方法

3.1.8 针刺方法

3.1.9 标本采取及指标测定

3.1.10 统计方法

3.2 结果与分析

3.2.1 治疗后各组大鼠AsAb水平比较

3.2.2 治疗后各组大鼠IFN-γ水平比较

3.2.3 治疗后各组大鼠IL-4水平比较

3.2.4 治疗后各组大鼠IFN-γ/IL-4比值比较

3.2.5 治疗后各组大鼠IL-17水平比较

3.2.6 IL-17与IFN-γ、IL-4的关系

3.3 讨论

3.3.1 AsAb阳性大鼠模型的建立及依据

3.3.2 AsAb水平的变化分析

3.3.3 加减归肾方结合针刺对AsAb阳性大鼠IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4比值(即Thl/Th2平衡)及IL-17的影响

3.3.4 IL-17与IFN-γ、IL-4的关系分析

3.4 结论

结语

参考文献

附录

致谢

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摘要

目的:本研究从神经内分泌免疫调节网络的角度出发,通过临床研究与基础动物实验两方面的综合研究,对受试对象相关实验指标进行测定,观察其在治疗前后的变化,来探讨加减归肾方结合针刺治疗抗精子抗体阳性不孕症的临床疗效及作用机理。
  方法:
  1.临床研究:采用前瞻性随机对照实验方案,分组方法采用简单随机化法。将合格受试者分为两组,每组各36例。第一组为中药加减归肾方组,予加减归肾方;第二组为针药组(针刺+加减归肾方),予加减归肾方结合针刺双侧次髎穴、肝俞穴、肾俞穴、关元俞穴、太冲穴及三阴交等穴位。观察治疗后患者怀孕情况、检测治疗前后患者血清β-EP、AsAb、ENK水平。
  2.动物实验:采用随机对照实验方案,以78只SD大鼠为实验对象,采用主动免疫法,用人精子混悬液加弗氏完全佐剂经皮下多点注射,造出抗精子抗体阳性动物模型。将实验动物随机分成6组,分别为空白对照组,AsAb阳性组(模型组),强的松组(西药组),加减归肾方组(中药组),单纯针刺组,加减归肾方结合针刺组(针药组)。在相同饲养条件下灌胃,空白对照组,模型组灌以等量清水(4ml/只),每日一次;西药组灌以强的松混悬液(1ml/只),每日一次;中药组及针药结合组灌以加减归肾方(4ml/只),每日一次;针刺组及针药结合两组,分别针刺大鼠双侧肾俞、三阴交、肝俞、太冲等穴位,留针每次20分钟,每天针刺1次。灌胃四周后,眶后静脉采血4ml,分离血清,进行指标测定,检测各组大鼠的AsAb、IFN-γ、IL-4、IL-17水平,分析IFN-γ/IL-4比值。
  结果:
  1.临床研究:(1)中药组,受孕11例,妊娠率为30.56%,血清AsAb的转阴率为58.33%,总有效率为83.33%;针药组,受孕20例,妊娠率为55.56%,血清AsAb的转阴率63.89%,总有效率为88.89%。经统计学分析,两组的妊娠率比较,差异有统计学意义(P<0.05),针药组妊娠率明显高于中药组;两组血清AsAb转阴率及总有效率比较,差异无统计学意义。(2)β-EP水平和ENK水平在中药治疗前后比较,差异均无统计学意义;β-EP水平和ENK水平在针药治疗前后比较,差异均有统计学意义。
  2.动物实验:(1)与空白组相比,模型组的AsAb、IFN-γ、IL-4、IL-17水平及IFN-γ/IL-4比值均显著升高,差异有统计学意义。(2)AsAb水平测定:与模型组相比,中药组和针药组的AsAb水平下降明显,差异有统计学意义;西药组和针刺组的AsAb水平与模型组,差异无统计学意义。(3)IFN-γ水平测定:与模型组相比,西药组、中药组、针刺组和针药组的IFN-γ水平均降低,差异有统计学意义;西药组、中药组、针刺组和针药组之间两两比较,差异有统计学意义,各组IFN-γ下降程度比较是:针药组>针刺组>中药组>西药组。(4)IL-4水平测定:与模型组相比,西药组、中药组、针刺组和针药组的IL-4水平均降低,差异有统计学意义;针药组IL-4下降程度比西药组、中药组、针刺组明显,差异有统计学意义。(5)IFN-γ/IL-4比值测定:与模型组相比,西药组、中药组、针刺组和针药组的IFN-γ/IL-4比值均降低,差异有统计学意义;中药组、针刺组和针药组的IFN-γ/IL-4比值低于西药组水平,差异有统计学意义。(6)IL-17水平测定:与模型组相比,中药组、针刺组和针药组的IL-17水平均降低,差异有统计学意义;西药组与模型组比较,差异无统计学意义;中药组、针刺组和针药组之间两两比较差异无统计学意义。(7)IL-17与IFN-γ相关性分析, IL-17与IFN-γ之间呈正相关性;IL-17与IL-4相关性分析,IL-17与IL-4之间呈正相关性。
  结论:
  1.临床研究:(1)针药结合与单纯中药治疗都可以降低患者的AsAb水平,治疗总有效率无明显差异,但针药结合可以明显提高患者的受孕率,在提高抗精子抗体阳性不孕症患者的受孕率方面优于单纯中药处理。(2)针药结合治疗对患者β-EP和ENK的影响比较明显,比治疗前可以明显降低血清中的β-EP和ENK的水平。而单纯中药治疗对患者β-EP和ENK的影响不明显。
  2.动物实验:(1)针药结合与中药都可以明显改善大鼠的AsAb水平,较西药与单纯针刺效果好。(2)大鼠产生AsAb后,IFN-γ、IL-4水平均升高,但IFN-γ升高幅度大于IL-4升高幅度,Thl/Th2平衡向Thl偏移,机体细胞免疫增强。(3)在IFN-γ、IL-4的改善上,针药结合优于单纯的西药、中药和针刺。(4)针药结合、中药、针刺都能够显著降低IFN-γ/IL-4比值水平,纠正Thl/Th2偏移现象。(5)在IL-17的改善上,针药结合、中药、针刺均有效,西药对于大鼠IL-17的改善不明显。(6)IL-17与IFN-γ、IL-4之间呈正相关性。

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