利用CK-19、CK-20和CEA分子标记侦测大肠癌患者外周血中循环性癌细胞

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第一部分 前言

1研究背景

1.1大肠癌(colorectal cancer，CRC)

1.2微转移的概念

1.3血管生成和微转移的生物学行为

1.4微转移和临床转移

1.5大肠癌微转移的检测方法

1.6大肠癌微转移检测的分子标记物

1.7大肠癌微转移检测的途径

1.8 研究意义及研究思路

第二部分 利用CK-19、CK-20和CEA分子标记侦测大肠癌患者血液中循环性癌细抱

1前言

2材料与方法

2.1临床资料

2.2主要仪器

2.3主要试剂

2.4主要试剂配方

2.5实验方法

2.6 RT-PCR扩增产物分析

2.7 PCR产物纯化及DNA测序

2.8 RT-PCR灵敏度测定

2.9病例回访

2.10统计分析

3实验结果

3.1本组资料的病例学特点

3.2总RNA鉴定

3.3RT-PCR方法检测外周血中CK-19、CK-20、CEAmRNA的表达

3.4 RT-PCR方法检测外周血中分子标志的灵敏度

3.5靶基因检出率与临床病理之间的关系

3.6靶基因表达、临床病理特征与术后微转移的关系

4讨论

4.1关于RT-PCR检测方法

4.2分子靶标的选择

4.3外周血中靶基因的表达、临床病理学特征及其术后微转移

4.4外周血中靶基因表达检测的意义

5小结

第三部分 实时荧光定量PCR方法侦测大肠癌患者血液中循环性癌细胞

1前言

2材料与方法

2.1临床资料

2.2主要仪器

2.3主要试剂

2.4实验方法

3实验技术路线

4实验结果

4.1熔解曲线的获得

4.2扩增效率的确定

4.3荧光定量PCR扩增靶基因

4.4 CK-19分子标记(mRNA)荧光定量PCR结果分析

4.5 CK-20分子标记(mRNA)荧光定量PCR结果分析

4.6 CEA分子标记(mRNA)荧光定量PCR结果分析

4.7组织和外周血中CK-19、CK-20、CEA分子标记的检测比对

5讨论

5.1关于荧光定量PCR技术

5.2荧光定量PCR技术的原理

5.3荧光定量PCR的定量方法

5.4临床诊断标准的评价

6小结

第四部分前景与展望

参考文献

致 谢