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大鼠和小鼠血清中ABO天然抗体的研究及其免疫学意义

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论文说明:缩略语

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第一章绪论

1.1序言

1.2 ABO血型抗原

1.3天然抗体

1.4本文的研究意义及创新点

第二章大鼠和小鼠血清对人红细胞的凝集作用

2.1材料与方法

2.2结果与分析

2.3讨论

2.4小结

第三章大鼠和小鼠血清中使人红细胞凝集组分的鉴定

3.1凝集抑制实验

3.1.1材料与方法

3.1.2结果与分析

3.1.3 讨论

3.1.4小结

3.2 ELISA实验

3.2.1材料与方法

3.2.1结果与分析

3.2.3讨论

3.2.4小结

3.3 ABO血型抗体的纯化

3.3.1材料与方法

3.3.2结果与分析

3.3.3讨论

3.3.4 小结

第四章ABO血型抗体随个体年龄的变化

4.1材料与方法

4.2结果与分析

4.3讨论

4.4小结

第五章ABO血型抗体的定量初探

5.1材料与方法

5.2结果与分析

5.3讨论

5.4小结

第六章本研究的免疫学意义

6.1文献资料方面的证据

6.2本文的研究结果结合相关资料所作的讨论

6.3本文的观点与克隆选择学说的关系

6.4小结

第七章总结与展望

参考文献(References)

致谢

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摘要

本文由2个大鼠(Rattus norvegicus)品系(Sprague Dawley、Wistar)和2个小鼠(Mus musculus)品系(Balb/c、KM)的血清与人红细胞的凝集实验,观察到未经A、B或H抗原免疫的这4种鼠类血清都能与人A型、B型、AB型和O型红细胞发生不同程度的凝集,推测ABO血型抗体(抗A、抗B或抗H)可能普遍存在于大鼠和小鼠血清中。
   为对红细胞的凝集原因做进一步研究,应用凝集抑制实验和ELISA实验,证明了大鼠和小鼠血清中不但普遍存在IgM型ABO天然抗体,还同时存在着IgG型的ABO天然抗体;通过Protein G亲和纯化和吸收放散的方法,直接纯化出了SD大鼠血清中的ABO天然抗体,结合Western blot杂交分析直接证明了IgG型ABO天然抗体的存在(本实验室早期已经纯化出IgM型抗体)。
   通过在SPF级实验室中饲养SD大鼠,每10天采血分析血清中IgM型和IgG型ABO天然抗体的含量,探索了ABO天然抗体随个体年龄的变化情况。在此基础之上,通过抽提人的ABO红细胞膜脂,制备带ABO抗原的聚苯乙烯微球载体,纯化出了成年SD大鼠的抗B天然抗体;最后以所纯化的天然抗体作为标准,初步测定了成年SD大鼠个体中IgM型和IgG型抗B天然抗体的含量。
   本文较全面地探索了大鼠和小鼠血清中ABO天然抗体的存在情况,弥补了动物血型系统中ABO天然抗体研究的不足;其次,本文也为开展ABO血型不亲和的组织移植及其免疫排斥机理的研究和利用ABO天然抗体来提高抗原递呈效率及其机理的研究,提供了合适的动物模型;再者,本文结合大鼠和小鼠血清中的ABO天然抗体的研究结果和文献中报道的ABO血型抗原的相关研究,提出了一个免疫学新观点:抗原及其对应的抗体,在健康个体中不一定是“有”和“无”的关系,可以同时存在而不引起自身免疫性疾病,并且存在着数量反比效应,即自身抗原弱则抗体强,自身抗原强则抗体弱;它们之间在一定的阈值内维持着平衡关系,不同的个体、不同的生理状态、不同的抗原-抗体对可能具有不同的阈值,阈值内的平衡具有积极的生理学意义,一旦某种因素导致抗原或抗体突破阈值而打破平衡,就会发生自身免疫性疾病。

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