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广西水稻根围寄生线虫鉴定与潜力生防菌杀线虫活性检测

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摘要

1 前言

1.1 水稻线虫病害国内外研究进展

1.2 水稻线虫病害的防治

1.3 植物寄生线虫环境友好防治资源开发利用进展

1.3.1 食线虫真菌

1.3.2 生防细菌

1.3.3 放线菌

1.2.4 杀线虫植物

1.3.5 捕食性动物

1.4 菌物代谢产物杀线虫研发的优势

1.5 本课题研究的目的和意义

2 材料与方法

2.1 广西水稻根围寄生线虫鉴定

2.1.1 试验材料

2.1.2 仪器

2.1.3 试验方法

2.2 潜力生防菌杀线虫活性检测

2.2.1 试验材料

2.2.2 试剂

2.2.3 供试菌株

2.2.4 仪器

2.2.5 靶标线虫

2.2.6 潜力生防菌毒杀线虫活性检测方法

2.2.7 不同菌株发酵液对线虫孵化的影响试验方法

2.3 不同发酵时间和稀释倍数的生防真菌发酵液杀线虫活性检测

2.3.7 CQE-4菌株不同发酵时间和稀释倍数对大豆胞囊线虫自由卵孵化的影响试验方法

2.4 CQE-4菌株发酵液盆栽验证试验

2.4.1 试验材料

2.4.2 供试试剂

2.4.3 仪器

2.4.4 CQE- 4菌株发酵液盆栽验证试验方法

3 结果与分析

3.1 广西水稻根围寄生线虫鉴定

3.1.1 水稻根围寄生线虫种类及分布

3.1.2 水稻根围寄生线虫种类鉴定

3.1.3 两种水稻根内寄生线虫在广西地区的分布

3.2 潜力生防菌杀线虫活性检测

3.2.1不同菌株发酵液处理后大豆胞囊线虫J2的击倒率

3.2.2 不同菌株发酵液处理后大豆胞囊线虫J2的死亡率

3.2.3 不同菌株发酵液对大豆胞囊线虫自由卵孵化率的影响

3.2.4 不同菌株发酵液处理后潜根线虫的击倒率

3.2.5 不同菌株发酵液处理后潜根线虫的死亡率

3.2.6 不同菌株发酵液杀线虫活性测定总结

3.3 不同发酵时间和稀释倍数的生防真菌发酵液杀线虫活性检测

3.3.1 不同发酵时间和稀释倍数的生防真菌发酵液毒杀大豆胞囊线虫J2活性检测

3.3.2 CQE-4菌株发酵液不同发酵时间和稀释倍数对大豆胞囊线虫自由卵孵化的影响

3.3.3 不同发酵时间和稀释倍数的生防真菌发酵液毒杀潜根线虫活性检测

3.4 不同菌株发酵液对大豆胞囊线虫和水稻潜根线虫毒力分析

3.5 CQE-4菌株发酵液盆栽试验

4 讨论

4.1 广西水稻根围寄生线虫鉴定

4.2 潜力生防菌杀线虫活性检测

5 结论

参考文献

致谢

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摘要

植物寄生线虫病害已成为制约农作物生产的重要病害之一,严重威胁农作物生产安全。为明确广西水稻寄生线虫的种类及分布情况,本研究通过对广西14个地级市的68个县(区)水稻根围土壤寄生线虫进行分类鉴定研究,共采集188个土壤样品,分离鉴定出潜根属(Hirschmanniella)、根结属(Meloidogyne)、短体属(Pratylenchus)等25个科/属寄生线虫,其中,潜根属线虫分布最广,检出率为82.45%;矛线科线虫次之,检出率为76.06%;矮化属、根结属、丝尾垫刃属分布相对较广,检出率分别为:34.04%、27.66%、26.60%,盘旋属等其他属检出率比较少,只零星发生,检出率不超过10%。线虫种类及其分布是研究线虫病害防治的基础工作,本研究结果将对深入开展广西水稻寄生线虫的防治研究具有指导意义。
  生物防治是当前的研究热点,其作为一种安全有效的手段在植物病原线虫防治中得到了较为广泛的研究和应用,微生物代谢产物防治线虫是很有效的生物防治手段之一。本研究以大豆胞囊线虫和水稻潜根线虫为耙标试虫,对实验室前期筛选的较强杀线活性的9个菌株进行活性检测。
  室内生测研究结果表明,供试菌株中FCE-2、XO-2和CQE-4表现出很好的毒杀线虫活性。具体表现(1)FCE-2和XO-2两个菌株发酵液对大豆胞囊线虫和水稻潜根线虫均有较高的杀虫活性,处理线虫72h死亡率均超过70%。其中发酵2周10倍稀释液处理大豆胞囊线虫死亡率分别为91.36%和83.51%,发酵2周5倍稀释液处理潜根线虫分别为90.71%和70.11%;(2)FCE-2菌株2周和3周发酵液毒杀效果均高于1周发酵液;XO-2菌株发酵2周毒杀效果高于发酵1周和3周。(3)在相同条件下,获得相同死亡率时,与毒杀大豆胞囊线虫相比,毒杀潜根线虫需要更多的发酵液原液。FCE-2和XO-2处理72h时潜根线虫的LC50值分别为90.4451μ1/m1和76.3875μ1/m1,大豆胞囊线虫J2为44.9301μ1/m1和49.1746μ1/m1。(4)XN-2、XO-2菌株发酵液能显著抑制大豆胞囊线虫自由卵的孵化,处理18d抑制率分别达到90.85%和88.66%。CQE-4、FCE-2和FCD-2能控制卵累计孵化率在25%以内,显著低于对照(P<0.05)。(5)CQE-4菌株发酵液对大豆胞囊线虫J2有很强的毒杀活性,对卵的孵化有很强的抑制效果(P<0.05),但对潜根线虫没有显著的作用。盆栽验证试验中,CQE-41周、2周发酵液原液和稀释2倍、5倍液均可抑制线虫繁殖,其中,1周和2周发酵原液接种后48d虫口减退率分别为76.56%和83.52%。该研究结果为进一步研究该菌株的生防效果及研发有效生防菌剂提供重要理论信息。

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