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手性农药毒氟磷对水生动物颤蚓酶活性影响及其在颤蚓体内的选择性降解研究

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目录

缩略语(Abbreviations)

前言

第一章 文献综述

1.1 手性农药对水生生物的毒性效应研究

1.1.1 手性农药对水生植物的毒性效应研究

1.1.2 手性农药对水生动物的毒性效应研究

1.2 手性农药在水生生物体内的选择性富集、降解行为研究

1.2.1 手性农药在水生植物体内的选择性富集、降解行为研究

1.2.2 手性农药在水生动物体内的选择性富集、降解行为研究

1.3 水生动物颤蚓在水生态环境污染研究中的应用

1.4.1 毒氟磷简介

1.4.2 毒氟磷对映体的分析方法研究

1.4.3 毒氟磷的环境行为研究

1.5 小结

第二章 研究内容、目的及技术路线图

2.1 研究内容

2.2 研究目的

2.3 技术路线图

第三章 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓酶活性影响差异研究

3.1 试验材料

3.1.1 药品和试剂

3.1.2 仪器设备

3.1.3 试验生物

3.2 试验方案

3.2.1 颤蚓暴露培养试验

3.2.2 颤蚓体内酶活性测定

3.2.3 数据处理与分析

3.3 结果与讨论

3.3.1 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓蛋白含量的影响

3.3.2 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓SOD活性的影响

3.3.3 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓CAT活性的影响

3.3.4 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓MDA含量的影响

3.3.5 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓GR活性的影响

3.3.6 毒氟磷外消旋体及对映体对颤蚓GST活性的影响

3.4 小结

第四章 颤蚓、土壤和水样中毒氟磷对映体在LC-MS/MS上检测分析方法

4.1 试验材料

4.1.1 药品与试剂

4.1.2 仪器设备

4.1.2 试验生物与土壤

4.2 毒氟磷对映体的检测分析方法

4.2.1 毒氟磷对映体的在LC-MS/MS上检测条件

4.2.2 样品前处理方法

4.2.3 分析方法有效性检验

4.3 小结

第五章 毒氟磷在颤蚓体内的选择性降解行为研究

5.1 试验材料

5.2 试验方案

5.2.1 颤蚓暴露培养试验

5.2.1 颤蚓经水暴露培养试验

5.2.2 颤蚓经土暴露培养试验

5.2.2 样品检测分析

5.3 数据处理与分析

5.3.1对映体分数(Enantiomer fraction,EF)的计算

5.3.2 降解动力学分析

5.4.1 颤蚓经水暴露培养试验

5.4.2 颤蚓经土暴露培养试验

5.4.3 毒氟磷对映体在颤蚓经土培养体系中的分布情况

5.5 小结

第六章 结论与展望

6.1 结论

6.2 创新点

6.3 展望

致谢

参考文献

附录

附图

声明

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摘要

手性农药毒氟磷是一种具有良好抗病毒活性的α-氨基膦酸酯类新型抗病毒剂。目前关于手性农药毒氟磷对映体在水生态环境中的环境行为研究报道很少。本文以水生底栖动物颤蚓为模式生物,毒氟磷为研究对象,研究了毒氟磷外消旋体及其对映异构体对颤蚓体内丙二醛(MDA)含量、抗氧化酶等生化指标的影响及其在颤蚓体内的选择性降解行为。主要研究内容和结论如下: 1、通过颤蚓经水暴露富集试验,对颤蚓体内可溶性蛋白含量、MDA含量、以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、谷胱甘肽还原酶(GR)等抗氧化酶活性进行了测定,从而探讨毒氟磷外消旋体和对映异构体对颤蚓体内相关生化指标的影响差异。结果表明:毒氟磷外消旋体和对映异构体对颤蚓体内的总蛋白含量和GR活性无显著影响,对SOD、CAT和GST活性以及MDA含量表现为诱导激活作用,其中R对映体对SOD活性影响与S对映体和外消旋体之间差异明显,R对映体、S对映体和外消旋体三者之间对颤蚓CAT和GST活性影响差异显著,外消旋体对颤蚓MDA含量的影响小于对映异构体。 2、探讨了颤蚓体内相关生化指标变化与毒氟磷暴露剂量是否存在显著剂量-效应线性关系。结果表明颤蚓体内的SOD和CAT活性以及MDA含量变化与毒氟磷暴露剂量无显著地剂量-效应线性关系;GST活性变化与毒氟磷S单体和R单体的暴露剂量无显著地剂量-效应线性关系,而在暴露14d后,GST活性随外消旋体暴露剂量升高而增加。 3、通过Superchiral S-OD手性柱和液相色谱-质谱/质谱联用仪(LC-MS/MS)建立了颤蚓、底层土壤和上层水样中毒氟磷对映异构体的检测分析方法,并对方法进行了验证。结果表明毒氟磷S体和R体在3种基质中的平均添加回收率在82.31~108.58%之间,相对标准偏差(RSD)在0.50~12.51%之间,定量限(LOQ)和检出限(LOD)分别在0.01~0.02mg/kg之间和0.003~0.006mg/kg之间。 4、开展了颤蚓经水和经土暴露富集-降解试验,对颤蚓体内毒氟磷对映异构体的降解行为进行了研究。结果表明颤蚓能迅速消除体内的毒氟磷对映体;毒氟磷S体在颤蚓体内的降解速度快于R体。通过对经土培养体系中毒氟磷对映体的分布情况的研究,发现释放到底层土壤和上层水中的毒氟磷对映体浓度相对较少,且底层土壤中毒氟磷对映体的含量显著比上层水中的高,底层土壤和上层水中毒氟磷S对映体含量高于R对映体。颤蚓的生物扰动作用,会使底层土壤中的毒氟磷对映体向上层水中扩散。

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