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两种含绿原酸植物的质量控制方法和绿原酸制备工艺研究

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中药指纹图谱是指将某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。它能较全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。
　　 本文在分析总结了杜仲叶及杜仲雄花的化学成分、药理作用的基础上，采用HPLC指纹图谱技术对杜仲雄株和杜仲雌株绿叶、杜仲雄花中3种主要的次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷进行了含量测定及成分积累规律的分析，旨在为杜仲叶和杜仲雄花的质量控制和产业化提供必要的参考资料。同时，本文也分析总结了金银花的化学成分和药理作用，并采用酸醇回流法从忍冬绿叶中提取绿原酸，用大孔吸附树脂和乙酸乙酯进行纯化，旨在研究获取高纯度绿原酸的提取纯化工艺，为绿原酸的工业化生产提供详实的资料。
　　 本文的研究成果如下：
　　 (1)建立了杜仲雄株绿叶和杜仲雌株绿叶的HPLC指纹图谱。色谱条件是：Ameritech(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱；以甲醇-0.05％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱；柱温25℃，流速1.0mL/min；检测波长254nm；检测时间为60min。在此条件下，分别对杜仲雄株、杜仲雌株绿叶的指纹图谱进行评价，生成对照指纹图谱，确定了19个共有特征峰，并对其中主要次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷进行了含量测定。得出杜仲雄株绿叶和杜仲雌株绿叶指纹图谱相似度高，所含化学成分类似，但具体含量有差异。
　　 (2)建立了杜仲雄花的HPLC指纹图谱。色谱条件是：Ameritech(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱；以甲醇-0.05％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱：柱温25℃，流速1.0mL/min；检测波长238nm；检测时间为70min。在此条件下，分别对不同采集日期的杜仲雄花的指纹图谱进行评价，生成对照指纹图谱，确定了22个共有特征峰，并研究了次生代谢产物京尼平苷酸、绿原酸、京尼平苷的含量积累规律，得出杜仲雄花的盛花期是兼顾质量和产量的最佳采摘期的结论。
　　 (3)建立了HPLC法测定忍冬花蕾、茎枝、绿叶、落叶中绿原酸含量的方法。色谱条件是：ThermoSyneronisC18(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱，柱温为25℃，流动相为甲醇-0.05％磷酸溶液(25:75)，流速1.0mL/min，检测波长327nm。忍冬不同部位绿原酸含量顺序为：花蕾>绿叶>茎枝>落叶。
　　 (4)用酸醇回流法确定绿原酸的最佳提取工艺：12倍量80％乙醇，PH=4，回流2次，每次2.5h为最佳提取工艺条件。最佳的大孔吸附树脂型号为HPD100和HPD826，将提取液经过2次大孔吸附树脂进行纯化。然后用PH=3的乙酸乙酯萃取6～8次，浓缩，重结晶，得到纯度为74.8％的绿原酸。

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