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辽东楤木叶总皂苷对宫颈癌Hela细胞的抑制作用及机理探究

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目录

英文缩略词表

摘要

前言

文献综述

一、中药治疗妇科肿瘤的研究进展

1.中药复方治疗妇科肿瘤的研究概况

2.单味药及其有效成分治疗妇科肿瘤的研究概况

二、辽东楤木的药理学研究进展

1.抗炎

2.抗肿瘤

3.对物质代谢的影响

4.保护作用

5.促进肠吸收

3.土当归的抗肿瘤作用

实验研究

1.材料

2.实验方法

3.实验结果

二、辽东楤木叶总皂苷诱导宫颈癌Hela细胞发生凋亡的作用

1.材料

2.实验方法

3.实验结果

三、辽东楤木叶总皂苷对caspase-3,9活性的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

四、辽东楤木叶总皂苷对宫颈癌Hela细胞周期的作用及对周期相关蛋白表达的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

五、辽东楤木叶总皂苷对宫颈癌Hela细胞Akt蛋白质磷酸化水平的影响

1.材料

2.实验方法

3.实验结果

六、辽东楤木叶总皂苷对宫颈癌Hela细胞NF-κB信号传导通路的影响

1.材料

2.实验方法

3.实验结果

讨论

1.细胞凋亡与肿瘤的发生

1.1细胞凋亡的基本概念

1.2辽东楤木叶总皂苷的促凋亡作用

1.3 caspase家族与细胞凋亡

2.细胞周期与肿瘤的发生

3.Akt与肿瘤发生

结论

致谢

参考文献

附录

攻读博士期间发表的论文

声明

个人简历

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摘要

目的:本课题旨在研究辽东楤木叶总皂苷抑制宫颈癌Hela细胞生长的作用,并探讨其可能的作用机制。 方法:MTT法检测辽东楤木叶总皂苷对Hela细胞生长的抑制作用;Hoechst33258染色法检测辽东楤木叶总皂苷对细胞核形态的影响;原位凋亡检测试剂盒及Annexin-ⅤFITC/PI凋亡检测试剂盒检测辽东楤木叶总皂苷诱导细胞发生凋亡的作用;蛋白印迹法检测辽东楤木叶总皂苷对Hela细胞caspase3,9酶原蛋白质表达水平的影响,caspase3,9酶活性检测试剂盒检测Hela细胞caspase3,9酶活性的变化;流式细胞仪检测Hela细胞周期进程的变化,蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白P21、P27蛋白质水平的变化;蛋白印迹法检测辽东楤木叶总皂苷对Hela细胞Akt(ser473)、Akt(Thr308)、iκB-α、iκκα、NF-κB蛋白质磷酸化水平的影响。 结果:辽东楤木叶总皂苷可以有效的抑制宫颈癌Hela细胞的生长,且具有明显的剂量-时间依赖性;辽东楤木叶总皂苷可以诱导Hela细胞核发生调亡样改变,可促使细胞DNA双链发生断裂,导致早期凋亡百分率随药物剂量的增高而明显升高;辽东楤木叶总皂苷可下调Hela细胞caspase-3,9酶原的表达,促使caspase-3,9酶活性增强;辽东楤木叶总皂苷可阻滞Hela细胞周期的进程,使G1期DNA的含量明显升高,并且能够上调P21、P27蛋白质水平的表达;辽东楤木叶总皂苷可降低Hela细胞中Phospho-Akt(ser473)和Phospho-Akt(Thr308)的表达水平,同时下调细胞中Phospho-iκB-α、Phospho-iκκα、Phospho-NF-κB的表达。 结论:1)辽东楤木叶总皂苷可有效抑制宫颈癌Hela细胞的生长,其抑制作用可能与其诱导细胞发生凋亡、使细胞周期进程停滞于G1期有关。2)辽东楤木叶总皂苷可能通过影响上游Akt-NF-κB信号传导通路蛋白质磷酸化水平,从而增强caspase3,9的活性、上调P21、P27的表达来实现其抑制宫颈癌Hela细胞生长的作用。

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