声明
符号表
第1章 文献综述
1.1 氟的概述
1.2 氟的生理功能
1.3 氟的在机体的吸收与代谢
1.4 氟的毒性
1.5 氟诱导细胞损伤的研究进展
1.5.1 氟与细胞凋亡
1.5.2 氟与细胞自噬
1.6 研究目的与意义
第2章 氟调控PI3K/AKT信号通路诱导C2C12细胞凋亡
2.1 试验材料
2.1.1 细胞系
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器
2.1.4 试剂的配置
2.2 试验方法
2.2.1 C2C12复苏和传代培养
2.2.2 C2C12细胞半抑制浓度（IC50）的测定
2.2.3 C2C12细胞增殖的测定
2.2.4 C2C12细胞形态结构的观察
2.2.5 C2C12细胞超微结构的观察
2.2.6 C2C12细胞DNA损伤的检测
2.2.7 PI3K/AKT信号通路相关基因mRNA水平的检测
2.2.8 PI3K/AKT信号通路相关基因蛋白水平的检测
2.2.9 统计与分析
2.3 试验结果与分析
2.3.1 氟对C2C12细胞半抑制浓度（IC50）的测定
2.3.2 氟对C2C12细胞增殖的影响
2.3.3 氟对C2C12细胞生长的影响
2.3.4 氟对C2C12细胞形态结构的影响
2.3.5 氟对C2C12细胞超微结构的影响
2.3.6 氟对C2C12细胞DNA损伤的影响
2.3.7 C2C12细胞总RNA的提取及纯度鉴定
2.3.8 氟对PI3K/AKT信号通路相关基因mRNA表达水平的影响
2.3.9 氟对PI3K/AKT信号通路相关基因蛋白表达水平的影响
2.4 讨论
第3章 氟介导p53-p66Shc信号通路诱导C2C12细胞线粒体功能障碍
3.1 试验材料
3.1.1 细胞系
3.1.2 主要试剂
3.1.3 主要仪器
3.2 试验方法
3.2.1 C2C12细胞培养和处理
3.2.2 C2C12细胞超微结构的观察
3.2.3 C2C12细胞线粒体膜电位的检测
3.2.4 C2C12细胞ROS水平的测定
3.2.5 p53-p66Shc通路与线粒体相关基因mRNA水平的测定
3.2.6 p53-p66Shc通路与线粒体相关基因蛋白水平的测定
3.2.7 统计与分析
3.3 试验结果与分析
3.3.1 氟对C2C12细胞超微结构的影响
3.3.2 氟对C2C12细胞线粒体膜电位的影响
3.3.3 氟对C2C12细胞ROS水平的影响
3.3.4 C2C12细胞总RNA纯度与浓度的鉴定
3.3.5 C2C12细胞p53-p66Shc通路与线粒体相关基因扩增的特异性分析
3.3.6 氟对p53-p66Shc通路与线粒体相关基因mRNA表达水平的影响
3.3.7 氟对p53-p66Shc通路与线粒体相关基因蛋白表达水平的影响
3.4 讨论
第4章 氟调控内质网应激诱导C2C12细胞凋亡
4.1 试验材料
4.1.1 细胞系
4.1.2 主要试剂
4.1.3 主要仪器
4.2 试验方法
4.2.1 C2C12细胞培养和处理
4.2.2 C2C12细胞内Ca2+水平检测
4.2.3 C2C12细胞凋亡率的检测
4.2.4 C2C12细胞内质网应激与细胞凋亡相关基因mRNA水平的测定
4.2.5 内质网应激相关基因蛋白表达水平的测定
4.2.6 细胞凋亡相关基因蛋白表达情况的测定
4.2.7 统计与分析
4.3 试验结果与分析
4.3.1 氟对C2C12细胞内Ca2+水平的影响
4.3.2 氟对C2C12细胞凋亡率的的影响
4.3.3 氟对内质网应激与细胞凋亡相关基因mRNA表达水平的影响
4.3.4 氟对内质网应激相关基因蛋白表达水平的影响
4.3.5 氟对细胞凋亡相关基因蛋白表达情况的影响
4.4 讨论
第5章 氟对C2C12细胞自噬标志物表达水平的影响
5.1 试验材料
5.1.1 细胞系
5.1.2 主要试剂
5.1.3 主要设备
5.2 试验方法
5.2.1 C2C12细胞培养和处理
5.2.2 C2C12细胞自噬标志物表达水平的测定
5.2.3 C2C12细胞自噬标志物蛋白表达水平的测定
5.2.4 C2C12细胞自噬标志物蛋白表达情况的测定
5.2.5 统计与分析
5.3 试验结果与分析
5.3.1 C2C12细胞自噬标志物扩增的特异性分析
5.3.2 氟对自噬标志物mRNA表达水平的影响
5.3.3 氟对自噬标志物蛋白表达水平的影响
5.3.4 氟对自噬标志物蛋白表达情况的影响
5.4 讨论
第6章 氟对C2C12细胞炎性因子基因表达水平的影响
6.1 试验材料
6.1.1 细胞系
6.1.2 主要试剂
6.1.3 主要设备
6.2 试验方法
6.2.1 C2C12细胞培养和处理
6.2.2 C2C12细胞DNA损伤的检测
6.2.3 C2C12细胞周期的检测
6.2.4 炎性因子相关基因mRNA水平的测定
6.2.5 统计与分析
6.3 试验结果与分析
6.3.1 氟对C2C12细胞生长的影响
6.3.2 氟对C2C12细胞DNA损伤的影响
6.3.3 氟对C2C12细胞周期的影响
6.3.4 氟对炎性因子相关基因mRNA表达水平的影响
6.4 讨论
第7章 结论
参考文献
缩略语词汇表
致谢
攻读学位期间的研究成果
