河南省AIV H9分离株的免疫原性、细胞培养特性及分子生物学特性研究

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致谢

摘要

缩略词表

文献综述

1 禽流感概述

2 H9N2亚型禽流感的流行情况

3 禽流感病原学研究进展

3．1 禽流感的分类及亚型

3．2 禽流感的形态特征及理化特性

3．3 禽流感的培养特性

3．4 禽流感病毒的传播

4 禽流感病毒的分子生物学研究进展

4．1 禽流感病毒的基因组结构特征

4．2 禽流感病毒HA、NA基因及其编码蛋白的结构和功能

4．3 禽流感病毒的遗传变异

5 细胞培养禽流感病毒研究进展

引言

试验一 河南部分地区H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及交叉免疫攻毒保护试验

1 材料与方法

1．1 材料

1．2 方法

2 结果与分析

2．1 病毒分离结果

2．2 LH11、ZZ11两个分离株的RT-PCR结果

2．2 病毒HA效价及EID50测定结果

2．3 HI抗体测定结果

2．4 流行毒株间的交叉攻毒保护试验结果

3 结论与讨论

试验二 禽流感病毒H9亚型分离株在MDCK细胞上的培养特性研究

1．材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

2 结果与分析

2．1 病毒维持液中TPCK-胰酶含量对H9亚型禽流感病毒在MDCK上增殖的影响

2．2 病毒培养维持液中小牛血清(FBS)含量对H9亚型禽流感病毒在MDCK上增殖的影响

2．3 接种病毒含量对H9亚型禽流感病毒在MDCK上增殖的影响

2．4 病毒在细胞中吸附时间对H9亚型禽流感病毒HA滴度的影响

2．5 H9亚型禽流感病毒在MDCK细胞上连续传代的HA滴度

3 结论与讨论

试验三 H9亚型禽流感病毒胚毒和细胞毒HA基因和NA基因的克隆与序列分析

1 材料与方法

1．1 试验材料

1．2 试验方法

2 结果与分析

2．1 4株毒和ZZ11株毒的4个代次细胞毒的HA、NA基因片段RT-PCR扩增结果

2．2 4株毒和ZZ11株毒的4代细胞毒HA、NA基因片段RT-PCR产物胶回收纯化结果

2．3 重组质粒的酶切鉴定及测序鉴定

2．4 HA、NA基因序列测定及序列分析

2．5 系统进化树分析

3 结论与讨论

全文总结

参考文献

附录一 4株河南分离株HA基因推导氨基酸序列比对

附录二 4株河南分离株NA基因推导氨基酸序列比对

附录三 ZZ11株毒的胚毒和细胞毒HA基因推导氨基酸序列比对

附录四 ZZ11株毒的胚毒和细胞毒NA基因推导氨基酸序列比对